Anticorps polyclonal de lapin anti-LMAN1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49257

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LMAN1

• Encodée par le gène LMAN1, la protéine ERGIC-53 (également connue sous le nom de gp58, MR60 ou lectine mannose-binding 1) est une protéine transmembranaire de 510 acides aminés avec un poids moléculaire prédit d'environ 57,5 kDa et une bande observée à environ 54 kDa.
• Fonctionne comme une lectine spécifique du mannose qui reconnaît probablement les résidus de sucre sur les glycoprotéines, les glycolipides ou les ancrages GPI, et participe au tri et au recyclage des protéines au sein de la voie sécrétoire précoce.
• Forme un complexe récepteur de cargaison spécifique du RE vers l'appareil de Golgi avec MCFD2, assurant le transport avant de glycoprotéines sélectionnées (par exemple, les facteurs de coagulation V et VIII) du réticulum endoplasmique vers l'appareil de Golgi.
• Exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, ce qui est cohérent avec son rôle fondamental dans le trafic intracellulaire.
• Localisation subcellulaire : cycle entre le compartiment intermédiaire RE-Golgi (ERGIC), l'appareil de Golgi et les membranes du réticulum endoplasmique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et la formation de ponts disulfures ; contient une hélice transmembranaire unique et nécessite une liaison métallique pour une fonction de lectine appropriée.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène était un fragment recombinant couvrant les acides aminés 270 à 480 de LMAN1 humain (NP_005561.1), ce qui correspond à une grande partie du domaine luminal de la protéine ; cette région peut présenter des épitopes conformationnels favorables à la détection de LMAN1 endogène.
• Pour le Western blot (WB), une bande autour de 54 kDa est attendue dans les lysats de cellules humaines, de souris ou de rat ; optimisez le chargement et la dilution de l'anticorps en utilisant des témoins positifs (par exemple, cellules HeLa ou tissu hépatique) connus pour exprimer ERGIC-53.
• En immunohistochimie (IHC-P), envisagez une récupération d'antigène avec du tampon citrate (pH 6,0) et testez sur des sections de tissus fixés au formol et inclus en paraffine, tels que le foie, le pancréas ou le côlon, où LMAN1 est abondant.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), utilisez une étape de perméabilisation pour détecter la protéine dans les membranes de l'ERGIC/RE/Golgi ; une co-coloration avec des marqueurs d'organites (par exemple, GM130 pour l'appareil de Golgi cis) peut confirmer le motif réticulaire périnucléaire caractéristique.
• Dans les applications ELISA, la nature polyclonale de cet anticorps peut offrir une large couverture d'épitopes, mais la dilution et les conditions de blocage doivent être optimisées empiriquement pour le format d'essai spécifique.

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