Anticorps monoclonal de lapin anti-LIN28B pour WB, IP, IHC-P, ELISA - Q6ZN17

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de LIN28B

• LIN28B agit comme un inhibiteur de la biogenèse des microARN, ciblant spécifiquement les microARN de la famille let-7. Il se lie aux transcrits primaires de let-7 (pri-let-7) et les séquestre dans le nucléole, les protégeant du complexe de microprocesseurs et empêchant leur maturation (PubMed:22118463).
  Références associées :
  PMID:22118463
• Cette répression de l'expression de let-7 est essentielle au développement normal et contribue au maintien de la pluripotence des cellules souches embryonnaires en inhibant les signaux de différenciation.
  Références associées :
  PMID:22118463
• En cas de surexpression, LIN28B peut recruter l'uridyl transférase ZCCHC11/TUT4 vers les transcrits de pré-let-7, entraînant leur uridylation terminale et la dégradation des précurseurs de microARN (PubMed:19703396).
  Références associées :
  PMID:19703396
• La protéine contient deux domaines à doigts de zinc et un domaine de choc froid, ce qui la classe parmi les protéines de liaison à l'ARN impliquées dans la répression génique médiée par l'ARN.
• LIN28B est principalement localisée dans le nucléole et le noyau, mais peut également transiter vers le cytoplasme, ce qui est essentiel à sa fonction dans la maturation des microARN.
• L'analyse de l'expression tissulaire révèle des niveaux élevés dans le placenta, avec une expression plus faible dans les testicules et le foie fœtal. Des profils d'expression distincts des isoformes sont observés dans le carcinome hépatocellulaire.
• Le gène subit un épissage alternatif, produisant au moins deux isoformes : l'isoforme 1 favorise la croissance cellulaire, tandis que l'isoforme 2 ne le fait pas, ce qui suggère une divergence fonctionnelle.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, et la protéine est identifiée comme un marqueur protéomique ; elle comporte également une entrée de structure 3D.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène de cet anticorps couvre les acides aminés 1 à 163 de la protéine LIN28B humaine, ciblant la région N-terminale. Cette région comprend le domaine de choc froid et est conservée entre les isoformes décrites, ce qui peut permettre la détection des isoformes 1 et 2. Toutefois, une validation dans le système d'échantillon spécifique est recommandée.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 27 kDa est attendue. Assurez-vous d'effectuer une extraction adéquate des protéines, car LIN28B est principalement nucléaire et nucléolaire ; envisagez l'utilisation d'un tampon RIPA ou de kits d'extraction nucléaire pour améliorer sa solubilité.
• En immunohistochimie (IHC-P), prévoyez des profils de marquage nucléaires et nucléolaires. Utilisez des méthodes appropriées de révélation antigénique et validez le marquage avec des tissus témoins positifs, tels que le placenta ou des tissus cancéreux dans lesquels LIN28B est fortement exprimée.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), le format monoclonal de lapin offre une grande spécificité et une forte affinité. Optimisez la concentration de l'anticorps et les conditions d'incubation pour la lignée cellulaire ou le lysat tissulaire ciblé.
• Cet anticorps est validé pour les échantillons humains ; aucune réactivité croisée avec d'autres espèces n'a été rapportée. Les chercheurs doivent vérifier la réactivité en cas d'utilisation d'échantillons non humains.

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