Anticorps polyclonal de lapin anti-LIN28A pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H9Z2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LIN28A

• LIN28A (Protéine homologue A lin-28, également connue sous le nom de ZCCHC1) est une protéine de liaison à l'ARN conservée, caractérisée par deux domaines de choc froid et deux motifs de doigt de zinc CCHC, ce qui la place dans la famille des protéines à doigt de zinc.
• Il fonctionne comme un suppresseur de la biogenèse des microARN en se liant spécifiquement aux pré-miARN let-7 et à d'autres pré-miARN au niveau d'un motif de boucle terminale 5'-GGAG-3', recrutant ainsi les uridylyltransférases TUT4 et TUT7. L'uridylation déclenche la dégradation et empêche le traitement par Dicer, ce qui est crucial pour le maintien de la pluripotence (PubMed:18951094, PubMed:19703396, PubMed:22118463). Références connexes : PMID:18951094 PMID:19703396 PMID:22118463
• LIN28A agit comme un activateur de la traduction en dirigeant des ARNm spécifiques (par exemple, IGF2, MYOD1) vers les polysomes, augmentant la synthèse des protéines et la stabilité des ARNm, ce qui est essentiel pour la différenciation des muscles squelettiques (PubMed:21247876). Références connexes : PMID:21247876
• Il se localise dans plusieurs compartiments sous-cellulaires : cytoplasme, réticulum endoplasmique rugueux, corps P, granules de stress et le nucléole, reflétant ses rôles diversifiés dans le métabolisme de l'ARN.
• LIN28A est fortement exprimé dans les cellules souches embryonnaires, le placenta et les testicules, et est fréquemment surexprimé dans les tumeurs du sein surexprimant HER2, ce qui le lie à la « stemness » et à l'oncogenèse.
• Les modifications post-traductionnelles de LIN28A comprennent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité et ses interactions protéiques.
• De plus, LIN28A se lie et améliore la traduction des ARNm codant pour des enzymes métaboliques telles que PFKP, PDHA1 et SDHA, augmentant ainsi la glycolyse et la phosphorylation oxydative pour soutenir la réparation tissulaire.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100 à 209 du LIN28A humain. Compte tenu de la forte conservation de la séquence, une réactivité croisée avec le LIN28A de souris est attendue, ce qui est conforme à la réactivité documentée du produit.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 23 kDa ; utilisez des pourcentages de gel appropriés (par exemple, SDS-PAGE à 12–15 %) et incluez des contrôles de chargement pertinents.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), validez l'anticorps dans des tissus ou des lignées cellulaires exprimant LIN28A (par exemple, cellules souches embryonnaires, testicules). Les conditions de récupération de l'antigène et les dilutions de l'anticorps doivent être optimisées de manière empirique.
• En raison de sa multi-localisation, l'IF/ICC peut révéler des motifs de coloration cytoplasmique et nucléolaire ; une co-coloration avec des marqueurs d'organites est recommandée pour confirmer la spécificité.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée pour les dosages quantitatifs ; envisagez d'inclure des témoins positifs et négatifs dans chaque expérience.

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