Anticorps polyclonal anti-LGR5 pour WB, FC, ELISA - O75473

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du LGR5

• Le LGR5 (récepteur couplé aux protéines G 5 contenant des répétitions riches en leucine), également appelé GPR49, GPR67, HG38, FEX ou GRP49, est un récepteur membranaire à passages multiples caractérisé par des répétitions riches en leucine et un domaine à 7 transmembranes.
• Il fonctionne comme un récepteur pour les R-spondines (RSPO1–4), potentialisant la signalisation Wnt canonique. Lors de la liaison du ligand, le LGR5 s'associe au LRP6 phosphorylé et aux récepteurs Frizzled pour activer l'expression des gènes cibles de Wnt, sans engager de protéines G hétérotrimériques.
• Le LGR5 est un marqueur bien établi des cellules souches adultes, en particulier à la base des cryptes intestinales et dans le renflement (bulge) du follicule pileux, et est essentiel pour le maintien et le développement de ces populations de cellules souches épithéliales.
• Au niveau subcellulaire, le LGR5 se localise à la membrane cellulaire, à l'appareil de Golgi et à la membrane du réseau trans-Golgien.
• L'expression tissulaire comprend le muscle squelettique, le placenta, la moelle épinière et diverses régions du cerveau. Dans le tractus gastro-intestinal, le LGR5 est spécifiquement exprimé dans les cellules souches à la base des cryptes de la muqueuse colique et de l'intestin grêle. Dans les conditions précancéreuses, son expression s'étend au-delà de la base des cryptes, et il est surexprimé dans les cancers de l'ovaire, du côlon et du foie.
• Les modifications post-traductionnelles incluent les ponts disulfure et la glycosylation. L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et la protéine contient un peptide signal pour le ciblage de la voie de sécrétion.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un peptide synthétique de la région C-terminale (aa 480–580) du LGR5 humain. En Western blot (WB), envisagez de vérifier la détection de la protéine pleine longueur au poids moléculaire prévu d'environ 100 kDa (calculé à 99 998 Da) dans des conditions réductrices.
• Pour la cytométrie en flux (FC), le LGR5 est un récepteur de surface cellulaire ; utilisez des cellules intactes, non perméabilisées, pour détecter l'expression de surface. Confirmez le marquage dans des lignées cellulaires ou des tissus primaires ayant une expression connue du LGR5 (par exemple, organoïdes intestinaux) et incluez des témoins d'isotype.
• Dans les applications ELISA, cet anticorps polyclonal peut servir de réactif de capture ou de détection. Une réactivité croisée avec le LGR5 de souris a été rapportée ; cependant, une validation dans le format d'essai spécifique est recommandée.
• Le blocage par peptide ou les lignées cellulaires knock-out peuvent être utilisés comme témoins de spécificité pour distinguer les signaux spécifiques des signaux non spécifiques dans toutes les applications.

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