Anticorps monoclonal de lapin anti-Légumaïne (LGMN) pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q99538

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la légumaïne

• La légumaïne, également appelée asparaginyl endopeptidase (AEP), est une cystéine protéase présentant une spécificité stricte pour l'hydrolyse des liaisons asparaginyle ; elle peut également cliver lentement les liaisons aspartyle dans des conditions acides. Références associées : PMID:23776206
• Elle joue un rôle essentiel dans la présentation antigénique de classe II du CMH en traitant les protéines du système lysosomal/endosomal. Références associées : PMID:9872320
• Dans les cellules dendritiques présentant des antigènes croisés, la légumaïne médie la présentation antigénique de classe I du CMH en clivant et maturant la perforine-2 (MPEG1), facilitant la translocation de l'antigène vers le cytosol.
• La légumaïne est nécessaire pour la dégradation lysosomale normale des protéines dans les tubules proximaux rénaux et pour la dégradation de l'EGFR internalisé, régulant ainsi la prolifération cellulaire.
• La protéine se localise principalement dans les lysosomes et est exprimée de manière ubiquitaire, avec une abondance maximale dans le rein, le cœur et le placenta.
• La légumaïne est synthétisée sous forme de zymogène, subit une activation autoprotéolytique, et existe sous plusieurs isoformes par épissage alternatif ; elle contient des ponts disulfures et des sites de N-glycosylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 26-288) correspond à la forme pro de la légumaïne dépourvue de peptide signal, donc l'anticorps peut reconnaître à la fois la forme pro (~49 kDa) et l'enzyme mature (~42 kDa) en Western blot.
• Pour le WB, pensez à charger une quantité adéquate de protéine et à utiliser des agents de blocage appropriés, car la légumaïne peut apparaître sous forme de doublet en raison de différences de traitement ou de glycosylation.
• En IF-P et IHC-P, attendez une coloration ponctuée lysosomale ; incluez des marqueurs d'organites pour vérifier la localisation.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la légumaïne de souris et de rat, ce qui permet des études comparatives entre espèces ; cependant, validez-le dans votre système d'échantillons car les niveaux d'expression et le traitement peuvent varier.

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