Anticorps monoclonal anti-légumaïne (LGMN) pour WB, ELISA - Q99538

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la légumaïne (LGMN)

• La légumaïne, également connue sous le nom d’endopéptidase asparaginylée (AEP) ou de protéase à cystéine 1 (PRSC1), est une protéase à cystéine codée par le gène LGMN.
• Elle présente une spécificité stricte pour l’hydrolyse des liaisons asparaginylées et peut également cliver lentement les liaisons aspartylées, notamment dans des conditions acides. Références associées : PMID:23776206
• La légumaïne participe au traitement des protéines destinées à la présentation des antigènes par le CMH de classe II au sein du système lysosomal/endosomal. Références associées : PMID:9872320
• Dans les cellules dendritiques présentant des antigènes de manière croisée, elle joue un rôle dans la présentation des antigènes par le CMH de classe I en intervenant dans le clivage et la maturation de la perforine-2 (MPEG1), facilitant ainsi la translocation des antigènes dans le cytosol.
• Elle est nécessaire à la dégradation normale des protéines lysosomales dans les tubules proximaux rénaux ainsi qu’à la dégradation de l’EGFR internalisé, ce qui l’associe à la régulation de la prolifération cellulaire.
• La protéine se localise principalement dans les lysosomes et est exprimée de manière ubiquitaire, avec une abondance maximale observée dans les reins, le cœur et le placenta.
• La légumaïne est synthétisée sous forme de zymogène et subit une activation protéolytique ; il s’agit d’une glycoprotéine contenant des ponts disulfure et appartenant à la famille C13 des peptidases à cystéine.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 210-302 de la légumaïne humaine, une région susceptible de contenir une partie du domaine catalytique ; cette conception peut contribuer à la reconnaissance spécifique de la protéase mature.
• Pour le Western blot dans des conditions réductrices, une bande autour de 49 kDa est attendue pour la forme précurseur ou mature ; il est recommandé d’inclure des inhibiteurs de protéases appropriés lors de la préparation des échantillons.
• Compte tenu de la réactivité croisée rapportée avec la souris et le rat, l’anticorps peut être évalué chez ces espèces dans le cadre d’études comparatives, mais une validation doit être réalisée dans le système d’échantillons concerné.
• Pour les applications ELISA, l’anticorps peut convenir aux formats direct et indirect ; il convient d’envisager son association avec un anticorps de détection reconnaissant un épitope distinct pour les dosages en sandwich.

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