Anticorps monoclonal de lapin anti-LEF1 pour WB, IP, ELISA - Q9UJU2

Spécifications et paramètres fondamentaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de LEF1

• LEF1 est un facteur de transcription nucléaire qui se lie à l’ADN de manière séquence-spécifique (PubMed:2010090). Il joue un rôle central dans la voie de signalisation Wnt. Références connexes : PMID:2010090
• Lorsqu’il s’associe à CTNNB1 et EP300, LEF1 active la transcription des gènes cibles, tandis que les membres de la famille TLE (TLE1–4) agissent comme répresseurs (PubMed:11266540). Références connexes : PMID:11266540
• LEF1 régule la fonction de l’amplificateur du récepteur alpha des lymphocytes T et est nécessaire à la maturation des lymphocytes T gamma-delta exprimant IL17A (PubMed:19653274). Références connexes : PMID:19653274
• Dans le cancer du pancréas, LEF1 active MYC et CCND1, favorisant la prolifération ; une isoforme dépourvue du domaine de liaison à CTNNB1 antagonise la signalisation Wnt.
• Les fonctions indépendantes de CTNNB1 comprennent l’activation des promoteurs de la fibronectine et la répression de ceux de l’E-cadhérine, ce qui augmente la migration des cellules tumorales et réduit leur agrégation.
• Principalement localisé dans le noyau, LEF1 est exprimé dans le thymus et surexprimé dans les biopsies de tumeurs coliques et pancréatiques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et l’ubiquitination ; il s’agit d’une phosphoprotéine liant l’ADN impliquée dans la dysplasie ectodermique.
• LEF1 régule également positivement la différenciation des odontoblastes et pourrait contribuer à la différenciation des cellules ciliées ainsi qu’à la morphogenèse des follicules.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit de la protéine est d’environ 44 kDa ; validez la spécificité de la bande à l’aide de lysats de cellules humaines et murines. Envisagez l’utilisation d’extraits nucléaires afin d’enrichir le signal de LEF1.
• En immunoprécipitation (IP), l’immunogène recombinant (aa 1-300) cible la région N-terminale ; il peut donc détecter plusieurs isoformes de LEF1. Confirmez l’efficacité de la capture avec des partenaires d’interaction connus.
• Pour l’ELISA, optimisez les conditions de revêtement et utilisez une protéine recombinante comme étalon afin de générer des courbes d’étalonnage quantitatives.
• Une réactivité croisée entre les espèces humaine et murine a été démontrée ; pour les autres espèces, l’homologie de séquence doit être vérifiée avant utilisation.
• Compte tenu de son rôle dans la signalisation Wnt, cet anticorps peut être utilisé pour étudier l’activation de la voie dans des modèles de cancer ; toutefois, une validation empirique dans chaque contexte expérimental est recommandée.

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