Anticorps polyclonal de lapin anti-LCK pour WB, IHC-P, ELISA - P06239

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la LCK

• La LCK est une tyrosine kinase spécifique des lymphocytes de 56 kDa (p56lck) et un membre de la famille Src. Elle contient des domaines SH2 et SH3 et est ancrée à la membrane plasmique par myristoylation et palmitoylation N-terminales.
• La LCK est constitutivement associée aux queues cytoplasmiques des corécepteurs CD4 et CD8. Lors de l’engagement du TCR, la LCK est recrutée au complexe TCR-CD3, où elle phosphoryle les résidus tyrosine au sein des ITAM des chaînes CD3 et TCRζ, déclenchant la signalisation en aval. Références associées : PMID:2470098, PMID:40592325
• Cette kinase phosphoryle et active ZAP70, entraînant l’activation des lymphocytes et la production de lymphokines. La LCK participe également à la signalisation du récepteur de l’IL-2 et phosphoryle d’autres substrats, notamment RUNX3, PTK2B et RHOH. Références associées : PMID:2470098
• La LCK est exprimée spécifiquement dans les cellules lymphoïdes et est présente tout au long du développement des thymocytes, régulant les points de contrôle de la maturation du pré-TCR et du TCR αβ mature.
• Au niveau subcellulaire, la LCK se localise du côté cytoplasmique de la membrane cellulaire ainsi que dans le cytosol, où elle est prête à interagir avec les récepteurs de surface.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent des ancres lipidiques N-terminales (myristate et palmitate), plusieurs événements de phosphorylation (autophosphorylation au niveau de Tyr394 et phosphorylation inhibitrice au niveau de Tyr505 par CSK), ainsi que l’ubiquitination. L’épissage alternatif produit des isoformes.
• La LCK est impliquée dans certaines maladies ; les réarrangements chromosomiques impliquant LCK sont associés aux lymphomes à cellules T, et les mutations germinales peuvent provoquer une immunodéficience combinée sévère. Des protéines virales telles que Nef du VIH-1 ciblent la LCK afin de moduler la fonction des lymphocytes T.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène (aa 1-240) couvre les domaines N-terminal unique et SH3, qui sont moins conservés parmi les membres de la famille Src ; cette conception peut améliorer la spécificité pour la LCK.
• Pour la WB, une bande d’environ 56-58 kDa est attendue dans les lysats de cellules lymphoïdes (par exemple, Jurkat, PBMC humaines, splénocytes de souris). Optimisez la préparation des échantillons et la dilution de l’anticorps pour votre système.
• Pour l’IHC-P, une récupération antigénique peut être nécessaire ; les tissus témoins positifs comprennent le thymus humain ou les ganglions lymphatiques. Validez le marquage dans des échantillons expérimentaux pertinents.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec la LCK de souris et de rat ; en cas d’utilisation avec d’autres espèces, vérifiez indépendamment la réactivité.
• En tant qu’anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être évaluée ; il convient aux applications ELISA lorsqu’il est associé à des anticorps secondaires appropriés.

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