Anticorps polyclonal anti-LAMP2 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P13473

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LAMP2

• LAMP2 (Glycoprotéine 2 associée à la membrane lysosomale), également connue sous le nom de CD107b, LAMPB ou LGP-96, est codée par le gène LAMP2 et existe sous la forme de trois isoformes issues d'un épissage alternatif : LAMP-2A, LAMP-2B et LAMP-2C.
• Essentielle pour la biogenèse des lysosomes et le maintien du pH lysosomal en inhibant directement le canal à protons TMEM175, facilitant ainsi l'acidification lysosomale pour une activité hydrolase optimale (PubMed:37390818).
  Références associées : PMID:37390818
• Joue un rôle crucial dans l'autophagie médiée par les chaperonnes (CMA) en se liant aux protéines substrats (par exemple, GAPDH, GPX4, NLRP3, MLLT11) reconnues par HSPA8/HSC70 et en les ciblant pour une dégradation lysosomale, un processus important pour le contrôle de la qualité des protéines et les réponses au stress (PubMed:11082038, PubMed:18644871, PubMed:24880125, PubMed:36586411).
  Références associées : PMID:11082038 PMID:18644871 PMID:24880125 PMID:36586411
• Nécessaire pour la fusion des autophagosomes avec les lysosomes lors de la macroautophagie, car les cellules dépourvues de LAMP2 ne parviennent pas à accumuler STX17 sur les autophagosomes, empêchant la fusion et la dégradation du contenu autophagique (PubMed:27628032).
  Références associées : PMID:27628032
• Facilite la présentation efficace des antigènes exogènes médiée par les molécules de classe II du CMH en assurant une dégradation lysosomale appropriée, bien qu'elle ne soit pas requise pour la présentation des antigènes endogènes (PubMed:15894275, PubMed:20518820).
  Références associées : PMID:15894275 PMID:20518820
• Se localise sur les membranes des lysosomes, des endosomes tardifs, des autophagosomes et à la surface cellulaire, ce qui correspond à son trafic via les voies endocytique et autophagique.
• Les isoformes présentent une expression spécifique aux tissus : LAMP-2A est fortement exprimée dans le placenta, les poumons et le foie ; LAMP-2B est exprimée de manière ubiquitaire ; LAMP-2C est détectée dans l'intestin, le cœur, le cerveau et le muscle squelettique (PubMed:26856698, PubMed:7488019).
  Références associées : PMID:26856698 PMID:7488019
• Fortement glycosylée avec des ponts disulfures ; classée comme glycoprotéine et protéine transmembranaire. Associée à la maladie de Danon (glycogénose due à une déficience en LAMP2).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine luminal de la LAMP2 humaine (aa 29-375), qui est fortement glycosylé. Prenez cela en compte lors de l'interprétation des décalages de poids moléculaire en western blot ; la bande observée peut apparaître plus grande que les 45 kDa prédits en raison de la glycosylation extensive.
• Pour le western blot (WB), validez l'anticorps dans votre matrice d'échantillon spécifique ; utilisez des conditions réductrices et chargez des contrôles appropriés.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de démasquage antigénique (par exemple, démasquage thermique) peuvent être nécessaires pour révéler les épitopes de LAMP2, en particulier dans les tissus fixés au formol et inclus en paraffine.
• En immunofluorescence (IF/ICC), la coloration LAMP2 doit montrer un motif lysosomal ponctué ; une co-coloration avec des marqueurs lysosomaux (par exemple, LAMP1) est recommandée pour confirmation.
• Cet anticorps polyclonal peut présenter des variations d'un lot à l'autre ; incluez des contrôles positifs et négatifs dans chaque expérience.

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