Anticorps monoclonal anti-LAMP1/CD107a pour WB, IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA - P11279

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de LAMP1/CD107a

• La glycoprotéine membranaire 1 associée aux lysosomes (LAMP1), également appelée CD107a ou LAMPA, est une protéine transmembranaire de type I fortement glycosylée, codée par le gène LAMP1. L’épissage alternatif génère plusieurs isoformes.
• Elle intervient dans la biogenèse des lysosomes, la régulation du pH, l’autophagie et l’homéostasie du cholestérol en inhibant le canal protonique TMEM175, facilitant ainsi l’acidification lysosomale (PubMed:37390818). Références associées : PMID:37390818
• Elle joue un rôle essentiel dans la cytotoxicité des cellules tueuses naturelles (NK) : elle est indispensable au déplacement des granules cytotoxiques et au transport de la perforine vers le granule lytique, et protège les cellules NK contre les dommages auto-infligés (PubMed:23632890, PubMed:23847195, PubMed:2022921). Références associées : PMID:23632890 PMID:23847195 PMID:2022921
• Elle sert de récepteur à la glycoprotéine du virus de Lassa, favorisant l’entrée virale, et facilite également le clivage médié par la FURIN de la protéine de fusion F du virus des oreillons (PubMed:24970085, PubMed:25972533, PubMed:27605678, PubMed:29295909). Références associées : PMID:24970085 PMID:25972533 PMID:27605678 PMID:29295909
• Elle présente des ligands glucidiques aux sélectines, assurant la médiation de l’adhésion cellulaire (PubMed:7685349). Références associées : PMID:7685349
• Elle est principalement localisée sur les membranes lysosomales et des endosomes tardifs, mais peut également être acheminée vers la surface cellulaire et les membranes des granules cytolytiques dans certaines conditions.
• Elle contient un vaste domaine luminal présentant plusieurs sites de glycosylation N-liée et des ponts disulfure, une hélice transmembranaire à passage unique et une courte queue cytoplasmique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène utilisé pour produire cet anticorps correspond aux acides aminés 29 à 382 de la LAMP1 humaine, englobant l’intégralité du domaine luminal. Il convient d’en tenir compte lors de la conception d’essais fondés sur les épitopes.
• En Western blot (WB), la LAMP1 apparaît sous forme d’une bande diffuse en raison de sa forte glycosylation, avec un poids moléculaire prédit d’environ 45 kDa (précurseur non glycosylé d’environ 38 kDa). Une détection optimale peut nécessiter une préparation minutieuse des échantillons et un blocage adéquat.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), des étapes de récupération antigénique et de perméabilisation peuvent être nécessaires pour accéder au compartiment lysosomal.
• Pour la cytométrie en flux (FC), un protocole de marquage intracellulaire est recommandé pour détecter la LAMP1 totale, tandis que le marquage de surface cellulaire peut visualiser la LAMP1 transloquée vers la membrane plasmique après activation (par exemple, dans un essai de dégranulation).
• Cet anticorps convient à l’ELISA ; validez son association avec des réactifs de capture et de détection appropriés dans la matrice d’échantillon concernée.

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