Anticorps monoclonal anti-Lamine A/C pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P02545

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Lamine A/C

• Les lamines A et C sont des composants majeurs de la lamina nucléaire, un réseau filamentaire sous-jacent à la membrane nucléaire interne, et sont codées par le gène LMNA par épissage alternatif.
• Elles fournissent un support structurel à l'enveloppe nucléaire, font le lien entre la chromatine et l'enveloppe nucléaire, et régulent l'assemblage nucléaire, l'organisation de la chromatine et la dynamique des télomères. Références associées : PMID:10080180, PMID:10580070, PMID:10587585
• Les lamines jouent un rôle dans la réparation de l'ADN : la Lamine A/C est recrutée sur les cassures double brin de l'ADN par XRCC4 et IFFO1, immobilisant les extrémités d'ADN cassées pour prévenir les translocations chromosomiques. Références associées : PMID:31548606
• La Lamine A/C régule la rigidité de la matrice en conférant des propriétés mécaniques nucléaires, influençant la migration et la différenciation cellulaires. Références associées : PMID:23990565, PMID:25127216
• La localisation subcellulaire comprend la lamina nucléaire, l'enveloppe nucléaire, le nucléoplasme, la matrice nucléaire et les "nuclear speckles".
• Les modifications post-traductionnelles telles que la prénylation, la méthylation, la phosphorylation, l'acétylation et la formation de liaison isopeptidique régulent l'assemblage et la fonction des lamines.
• De manière spécifique aux tissus, la prélamine-A/C s'accumule dans les cellules musculaires lisses vasculaires âgées et les lésions athérosclérotiques, contribuant à la sénescence cellulaire. Références associées : PMID:20458013
• Les mutations dans LMNA causent des laminopathies, incluant la dystrophie musculaire d'Emery-Dreifuss, la cardiomyopathie dilatée, les lipodystrophies et les syndromes de progéria.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 403–572, correspondant au domaine de queue C-terminal commun aux lamines A et C, qui est moins conservé parmi les protéines des filaments intermédiaires, suggérant une haute spécificité.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 74 kDa pour la lamine A et d'environ 65 kDa pour la lamine C ; les deux bandes peuvent être détectées. Validez en utilisant des extraits nucléaires de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat.
• Pour l'IHC-P et l'IF/ICC, une coloration de l'enveloppe nucléaire et du nucléoplasme est attendue. Une optimisation de la récupération antigénique et de la perméabilisation peut être nécessaire pour les tissus fixés au formol.
• Pour l'IP et l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour enrichir les complexes Lamine A/C ; cependant, les conditions de blocage et de lavage doivent être déterminées empiriquement.
• Étant donné la validation KO, cet anticorps est adapté pour confirmer la déplétion en Lamine A/C et étudier les phénotypes de perte de fonction dans les essais d'organisation nucléaire et de réparation de l'ADN.

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