Anticorps polyclonal de lapin anti-LAG3 pour WB et ELISA - P18627

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de LAG3

• La protéine du gène 3 d'activation des lymphocytes (LAG3, CD223) est un récepteur inhibiteur sur les lymphocytes T activés par l'antigène, qui délivre des signaux de régulation négative après liaison à son ligand. Références associées : PMID:20421648, PMID:35761082, PMID:7805750
• Son ligand principal est le CMH de classe II sur les cellules présentatrices d'antigènes ; il se lie également à la FGL1 sécrétée par les hépatocytes et certaines cellules tumorales. Références associées : PMID:30580966, PMID:32920841, PMID:35761082
• LAG3 inhibe la signalisation du récepteur des lymphocytes T (TCR) en rompant l'association CD3E-LCK, un processus qui implique l'ubiquitination du motif KIEELE et la formation de condensats avec CD3E. Références associées : PMID:40101708, PMID:40592325
• Il agit en synergie avec PD-1 pour inhiber l'activation des lymphocytes T spécifiques d'un antigène et régule négativement la prolifération, l'activation et l'homéostasie des lymphocytes T CD8+ et CD4+. Références associées : PMID:20421648, PMID:7805750, PMID:8647185
• Sur les lymphocytes T régulateurs, LAG3 contribue à leur fonction suppressive, et il agit également comme régulateur négatif de l'activation des cellules dendritiques plasmacytoïdes (Par similarité).
• La voie inhibitrice de LAG3 est exploitée par les tumeurs pour échapper à l'immunité antitumorale ; le blocage de LAG3 et PD-1 peut inverser l'épuisement des lymphocytes T, ce qui justifie l'immunothérapie anticancéreuse. Références associées : PMID:35981087, PMID:40101708
• LAG3 peut également fonctionner comme ligand pour le CMH-II sur les cellules présentatrices d'antigènes, favorisant l'activation/maturation des CPA et induisant une réponse immunitaire Th1.
• Au niveau sous-cellulaire, LAG3 se trouve à la membrane cellulaire et peut être sécrétée ; elle est principalement exprimée dans les lymphocytes T activés et un sous-ensemble de cellules NK. Les caractéristiques moléculaires clés comprennent les domaines immunoglobulines, les ponts disulfure, la glycosylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région extracellulaire N-terminale (aa 29–170), qui contient des domaines de type immunoglobuline probablement impliqués dans la liaison du ligand ; l'anticorps peut reconnaître LAG3 native et recombinante.
• Pour le Western blot, une bande proche de 57 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des conditions réductrices et de valider avec des lysats de lymphocytes T activés ou des lignées cellulaires transfectées par LAG3.
• Cet anticorps polyclonal est adapté pour l'ELISA ; un titrage et un appariement avec un anticorps de capture peuvent être nécessaires pour le développement d'un ELISA sandwich.
• Une réactivité croisée avec la LAG3 de souris et de rat a été observée ; cependant, l'alignement de séquence et un test préliminaire dans le modèle d'espèce concerné sont recommandés.
• Comme pour tout réactif polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre est possible ; incluez des contrôles positifs et négatifs et envisagez une expérience pilote initiale pour confirmer la réactivité dans votre système de test.

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