Anticorps polyclonal de lapin anti-lactyl-histone H4 (K5) (P62805) pour WB, DB, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'histone H4

L'histone H4 est un composant central du nucléosome, enveloppant et compactant l'ADN en chromatine pour réguler l'accès à la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication et la stabilité chromosomique. La modulation dynamique de la structure chromatinienne est gouvernée par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT), collectivement appelées le "code histone". Références associées : UniProt P62805

La lactylation de l'histone H4 sur la lysine 5 (correspondant à K6 dans la numérotation UniProt) a été identifiée comme une nouvelle marque épigénétique liant le métabolisme cellulaire à la régulation génique. Cette modification a été caractérisée dans les macrophages et les cellules tumorales, où elle est induite par l'accumulation de lactate et contribue à l'activation de programmes d'expression génique réparateurs PMID:31645732. D'autres sites de lactylation ont été cartographiés sur K9, K13, K17, K32, K78 et K92, soulignant le rôle étendu de cette acylation dans la signalisation chromatinienne PMID:31645732, PMID:37720100.

L'histone H4 se localise principalement dans le noyau et est intégrée aux chromosomes tout au long du cycle cellulaire. L'histone H4 acétylée est enrichie dans les noyaux des spermatides en maturation UniProt P62805.

Au-delà de la lactylation, l'histone H4 subit des modifications combinatoires étendues, incluant l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, la crotonylation, la succinylation et la butyrylation sur de multiples résidus, chacune contribuant à des états chromatinien et des résultats fonctionnels distincts. Les sites de modification clés et leurs enzymes modifiantes ont été largement catalogués. Références associées : PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:21925322, PMID:22389435, PMID:27105113.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide lactylé synthétique englobant la lysine 5 de l'histone H4 humaine. Pour une spécificité optimale, envisagez d'utiliser un peptide non lactylé ou des contrôles de pré-adsorption dans votre test.
• Cet anticorps est rapporté pour le Western blot (WB), le dot blot (DB) et l'ELISA. Pour le WB, une bande typique est attendue à ~11 kDa. La détection de l'histone H4 lactylée endogène peut nécessiter un enrichissement ou une optimisation des conditions de lyse en raison de la faible stœchiométrie.
• La large réactivité croisée prédite (Humain, Souris, Rat et autres) suggère des séquences d'épitope conservées entre les espèces. Néanmoins, une validation espèce-spécifique est recommandée.
• Lors de l'utilisation de cet anticorps en ELISA ou dot blot, confirmez l'efficacité de revêtement avec des antigènes lactylés de contrôle positif et envisagez un blocage avec de la BSA lactylée pour réduire le bruit de fond.
• Pour les applications liées à la chromatine, les protocoles d'extraction d'histones (extraction acide ou extraction au sel) sont conseillés pour enrichir les histones marquées.
• Toujours valider les performances de l'anticorps dans le système d'échantillon pertinent, car les modifications post-traductionnelles dépendent du contexte et peuvent varier selon le type cellulaire et l'état métabolique.

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