Anticorps Monoclonaux de Lapin Anti-Ku80 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P13010

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Ku80

• La protéine Ku80, également connue sous le nom de XRCC5, KU86, KUB2 ou NFIV, est la sous-unité de 86 kDa de l'auto-antigène Ku, un complexe de liaison à l'ADN hétérodimérique essentiel pour la réparation des cassures double-brin (DSB) de l'ADN via la voie classique de jonction d'extrémités non homologues (NHEJ). Avec XRCC6 (Ku70), elle forme l'hétérodimère Ku70:Ku80 qui se lie directement aux extrémités des DSB et sert d'échafaudage pour l'assemblage de la machinerie de réparation NHEJ centrale, incluant PRKDC (DNA-PKcs), afin d'aligner et de ligaturer les extrémités d'ADN brisées. Références connexes : PMID:11493912, PMID:33854234, PMID:34352203
• Ku80 est indispensable pour la recombinaison V(D)J, un processus spécialisé piloté par la NHEJ qui génère le répertoire diversifié des récepteurs des cellules T et des immunoglobulines lors du développement des lymphocytes. Références connexes : PMID:9742108
• En plus de son rôle structurel, Ku80 possède une activité lyase 5'-désoxyribose-5-phosphate, qui nettoie les sites abasiques près des extrémités des DSB pour les préparer à la ligature. Une activité hélicase d'ADN 3'-5' a également été rapportée, bien que sa signification in vivo reste incertaine. Références connexes : PMID:20383123, PMID:7957065
• Ku80 est impliqué dans le maintien des télomères, contribuant à la protection et à la régulation des extrémités chromosomiques. Références connexes : PMID:29490055
• Au-delà de la réparation de l'ADN, Ku80 fonctionne comme un co-facteur transcriptionnel, régulant l'expression des gènes en interagissant avec divers facteurs de transcription. Références connexes : PMID:12145306, PMID:8621488
• Ku80 participe à la réponse immunitaire innée aux virus à ADN en s'assemblant dans le complexe HDP-RNP, qui agit comme une plate-forme pour la phosphorylation d'IRF3 et active la voie cGAS-STING. Références connexes : PMID:28712728
• Ku80 peut se lier aux ARN cellulaires et recruter PRKDC, jouant un rôle dans la biogenèse des ribosomes, notamment par l'interaction avec l'ARN petit nucléolaire U3. Références connexes : PMID:32103174
• Localisé principalement dans le noyau et le nucléole, Ku80 s'associe à la chromatine et est soumis à de multiples modifications post-traductionnelles, incluant l'acétylation, la phosphorylation, l'ADP-ribosylation et la conjuguaison de type ubiquitine.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été élevé contre un peptide synthétique couvrant les acides aminés 633 à 732 du Ku80 humain. Lors de la conception d'expériences de validation, considérez que cette région peut être sujette à des modifications post-traductionnelles ou à des événements d'épissage alternatif qui pourraient affecter la liaison de l'anticorps.
• Western blotting (WB) : Attendez-vous à une bande spécifique à environ 83 kDa dans les lysats cellulaires humains. Incluez des témoins positifs et négatifs appropriés (par exemple, échantillons avec Ku80 knockout ou traités au siRNA) pour confirmer la spécificité.
• Immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC) : Ku80 présente une localisation nucléaire et nucléolaire. Optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour votre type de tissu ou de cellule, et validez la coloration avec un marqueur nucléaire connu.
• Immunoprécipitation (IP) : Cet anticorps peut être utilisé pour isoler le complexe Ku70/Ku80. La co-immunoprécipitation de Ku70 (XRCC6) sert de témoin fonctionnel.
• ELISA : Convient aux formats ELISA direct ou sandwich. Validez la réactivité croisée avec d'autres espèces si nécessaire, car l'anticorps est spécifié pour une réactivité humaine.

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