Anticorps Monoclonal Lapin Anti-KRAS+HRAS+NRAS pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P01111/P01112/P01116

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de KRAS+HRAS+NRAS

• NRAS fonctionne comme un transducteur de signal dans la voie de signalisation RAS-MAPK, régulant la prolifération cellulaire et la survie par la liaison cyclique de GDP/GTP et l'activité GTPase intrinsèque (PubMed:30712867).
  Références associées : PMID:30712867
• KRAS, HRAS et NRAS partagent une grande similarité de séquence, en particulier dans le domaine N-terminal (aa 1-100), qui est la région de l'immunogène, permettant à cet anticorps de détecter les trois isoformes.
• Les mutations oncogéniques de NRAS (généralement aux codons 12, 13 et 61) sont fréquentes dans les cancers humains, et l'anticorps reconnaît les formes sauvages et mutantes, ce qui le rend précieux pour la recherche en oncologie.
• NRAS se localise principalement à la membrane plasmique et à l'appareil de Golgi, où il médie les événements de signalisation sur ces sites.
• Les modifications post-traductionnelles, telles que la prénylation et la palmitoylation, sont critiques pour le ciblage membranaire et l'activité biologique de NRAS.
• La ligase E3 d'ubiquitine LZTR1 médie l'ubiquitination de NRAS, conduisant à sa dégradation par le protéasome et servant de mécanisme de régulation (PubMed:40934300).
  Références associées : PMID:40934300

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1-100 de Ras humain (P01111), une région conservée entre KRAS, HRAS et NRAS. Envisagez de valider la spécificité en utilisant des lignées cellulaires avec extinction ou invalidation (knockout) spécifique à l'isoforme si nécessaire.
• Pour le western blotting (WB), une bande autour de 21 kDa est attendue dans des conditions réductrices. Incluez des contrôles de chargement appropriés et envisagez d'utiliser un tampon de lyse RIPA pour une extraction efficace des Ras associés à la membrane.
• En immunofluorescence (IF/ICC), les protéines Ras sont généralement observées à la membrane plasmique et à l'appareil de Golgi ; une perméabilisation est requise. Un marquage nucléaire n'est pas attendu.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), utilisez des tampons de lyse optimisés contenant des détergents non ioniques et des inhibiteurs de protéases/phosphatases pour préserver les interactions protéine-protéine. Le pré-nettoyage (pre-clearing) et le titrage de l'anticorps peuvent améliorer la spécificité.
• La performance ELISA doit être évaluée avec la protéine Ras recombinante ou des lysats cellulaires ; la limite de détection dépendra du format de l'essai et du système de détection utilisé.

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