Anticorps polyclonal anti-KPNA4 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O00629

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du KPNA4

• Le KPNA4 code la sous-unité alpha-3 de l'importine (également connue sous le nom d'importine alpha Q1, Qip1, ou sous-unité alpha-4 de la karyophérine), une protéine adaptatrice de 58 kDa critique pour l'importation nucléaire classique. Références connexes : PMID:20818336
• Il fonctionne en se liant à des substrats contenant des signaux de localisation nucléaire (NLS) simples ou bipartites et en les liant à l'importine bêta (KPNB1) pour le transport à travers le complexe du pore nucléaire (NPC). Références connexes : PMID:20818336, PMID:28760339, PMID:29042532
• Le complexe importine-substrat s'amarre au NPC via les interactions KPNB1–nucléoporine et transloque de manière dépendante du Ran-GTP et consommatrice d'énergie ; la directionnalité est obtenue par la distribution asymétrique du Ran-GTP et du Ran-GDP. Références connexes : PMID:20818336, PMID:28760339, PMID:29042532
• Le KPNA4 médie l'importation nucléaire de divers cargaisons, notamment AARS1, MRTFA et RANBP3, et facilite également l'entrée nucléaire de protéines virales telles que l'UL84 du cytomégalovirus humain via la reconnaissance de NLS non classiques. Références connexes : PMID:10567565, PMID:20818336, PMID:28760339
• Au niveau subcellulaire, le KPNA4 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle de transport de cargaisons dans le noyau.
• La protéine est fortement exprimée dans les testicules, l'ovaire, l'intestin grêle, le cœur, le muscle squelettique, le poumon et le pancréas, avec une faible expression dans le rein, le thymus, le côlon et les leucocytes du sang périphérique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation ; la protéine contient des domaines de répétition Armadillo essentiels pour la liaison au NLS et est classée comme membre du protéome de référence impliqué dans le transport des protéines et les interactions hôte-virus.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène cible les acides aminés 1–240 de la terminaison N du KPNA4 humain, ce qui peut conférer une spécificité pour la sous-unité alpha de l'importine par rapport aux autres membres de la famille des karyophérines ; cependant, une validation dans le système modèle pertinent est recommandée.
• Pour le Western blot, une bande proche de 58 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; il est conseillé de titrer la concentration de l'anticorps pour un rapport signal/bruit optimal.
• En immunocytochimie et immunofluorescence, puisque le KPNA4 navette entre le cytoplasme et le noyau, les deux compartiments peuvent présenter une coloration ; l'accumulation nucléaire peut être plus proéminente dans certaines conditions.
• Pour l'immunohistochimie sur coupes de paraffine, la récupération de l'antigène et l'optimisation sur des tissus de microarrays contenant des tissus à forte et faible expression (par exemple, testicules vs rein) peuvent aider à confirmer la spécificité.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec la souris et le rat, ce qui le rend adapté aux études orthologues ; néanmoins, la réactivité croisée doit être vérifiée dans chaque lysat d'espèce.
• Lors de l'utilisation pour ELISA, considérez que les anticorps polyclonaux peuvent offrir une couverture d'épitopes plus large mais peuvent également présenter un bruit de fond plus élevé ; l'optimisation des étapes de blocage et de lavage est critique.

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