Anticorps polyclonal de lapin anti-Calpain 2 [Validé KO] pour WB, IHC-P, ELISA - P17655

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Calpain-2

• La Calpain-2, également connue sous le nom de M-calpaïne, est la grande sous-unité catalytique de la protéase neutre activée par le calcium calpaïne-2, codée par le gène CAPN2. Elle appartient à la famille des peptidases C2 et fonctionne sous forme d'hétérodimère avec une petite sous-unité régulatrice.
• En tant que thiol-protéase non lysosomale régulée par le calcium, elle catalyse la protéolyse limitée de substrats impliqués dans le remodelage du cytosquelette et la transduction du signal, jouant un rôle dans la migration, la prolifération et la différenciation cellulaires.
• La Calpain-2 clive protéolytiquement la myociline (MYOC) au niveau de l'Arg-226, un événement de clivage impliqué dans la régulation de la pression intraoculaire (PubMed:17650508). Références associées : PMID:17650508
• Suite à une stimulation neuronale, la Calpain-2 clive la CPEB3, ce qui abolit son activité de répresseur traductionnel, permettant ainsi la traduction des ARNm cibles de la CPEB3 (Par similitude).
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique et associée à la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec son activation et sa translocation dépendantes du calcium.
• L'expression tissulaire est ubiquitaire, reflétant son rôle fondamental dans les processus protéolytiques cellulaires à travers de multiples organes et types cellulaires.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la phosphorylation et le clivage autocatalytique, qui régulent son activité et sa fonction. Elle contient des domaines structurels clés tels que les domaines catalytiques de la calpaïne et les domaines de liaison au calcium, et est classée dans les familles des thiol-protéases et des hydrolases.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été généré en utilisant une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 350–680 de la Calpain-2 humaine (NP_001739.2), une région couvrant une partie du domaine catalytique et le domaine de liaison au calcium de type C2. Prenez en compte cette conception de l'immunogène lors de la validation de la réactivité dans votre système modèle.
• Pour les applications de Western blot (WB), attendez-vous à une bande au poids moléculaire prédit d'environ 80 kDa. Notez que la Calpain-2 peut subir un traitement autocatalytique, ce qui pourrait entraîner des fragments de poids moléculaire inférieur supplémentaires.
• L'anticorps est également adapté à l'immunohistochimie (IHC-P) et à l'ELISA. Lors de la réalisation d'IHC, incluez des contrôles appropriés et optimisez les conditions de démasquage antigénique pour les tissus d'intérêt.
• Une réactivité croisée a été observée avec des échantillons humains, murins et de rat. Pour d'autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence, en particulier dans la région de l'immunogène, avant utilisation.
• Étant donné que l'activité de la Calpain-2 dépend du calcium, prenez en compte la concentration en calcium dans vos tampons de lyse et vos conditions expérimentales, car cela peut affecter l'autolyse de la protéase et la disponibilité des épitopes.

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