Anticorps polyclonal de lapin anti-KLRK1 pour IF/ICC et ELISA - P26718

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de KLRK1/NKG2D

• KLRK1 (également connu sous les noms NKG2D et CD314) code la protéine membranaire intégrale de type II NKG2-D, un membre de la sous-famille K1 des récepteurs de type lectine des cellules tueuses. Il fonctionne comme un récepteur activateur et costimulateur essentiel à l’immunosurveillance innée et adaptative.
• Lorsqu’il se lie aux ligands apparentés au CMH de classe I inductibles par le stress (par exemple MICA/B, ULBP1-6) présents à la surface des cellules tumorales ou infectées par un virus, NKG2D transmet des signaux stimulants qui déclenchent un influx de calcium et aboutissent à l’expression du TNF-alpha et à une cytotoxicité médiée par la perforine.
• Dans les cellules tueuses naturelles (NK), NKG2D fournit à la fois des signaux d’activation primaire et de costimulation, tandis que dans les cellules T CD8+, il agit comme un récepteur costimulateur amplifiant les réponses adaptatives médiées par le TCR.
• Le récepteur est exprimé sur pratiquement toutes les cellules NK CD56+CD3- du sang périphérique, ainsi que sur les cellules T alpha-bêta et gamma-delta CD8+ et sur les cellules dendritiques tueuses productrices d’interféron (IKDC).
• Au niveau subcellulaire, NKG2D se localise dans la membrane cellulaire en tant que protéine transmembranaire présentant une topologie d’ancrage par signal. Il est soumis à une glycosylation et contient un pont disulfure au sein de son domaine extracellulaire de liaison au ligand.
• Les études structurales (structure 3D) ont élucidé l’interface de liaison avec les ligands, et la protéine appartient au protéome de référence, l’épissage alternatif générant des isoformes supplémentaires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène était un peptide synthétique couvrant les acides aminés 50 à 150 de KLRK1 humain (NP_031386.2). Pour assurer une reconnaissance appropriée, veillez à appliquer l’anticorps à des échantillons dans lesquels la séquence cible est préservée et l’épitope accessible (par exemple, dans des conditions non dénaturantes pour l’IF/ICC).
• Validez l’anticorps dans votre contexte cellulaire spécifique à l’aide de contrôles positifs, tels que des cellules NK activées par l’IL-2 ou des lignées de cellules T CD8+ connues pour exprimer KLRK1. Pour l’ELISA, envisagez de l’associer à un anticorps de capture si vous développez un immunodosage en sandwich.
• Bien que cela n’ait pas été testé ici, KLRK1 est une protéine transmembranaire dotée d’un domaine extracellulaire de liaison au ligand ; envisagez des protocoles de marquage de la surface cellulaire qui évitent la perméabilisation afin de détecter la membrane intacte lors d’expériences de cytométrie en flux.

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