Anticorps polyclonal anti-Klotho pour WB et ELISA - Q9UEF7

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de Klotho

• Klotho (KL) est une protéine membranaire de type I à passage unique, codée par le gène KL chez l’humain. Elle existe également sous forme de peptide sécrété généré par clivage protéolytique.
• Elle présente une activité de bêta-glucuronidase, capable d’hydrolyser des bêta-D-glucuronides stéroïdiens tels que l’œstradiol-3-bêta-D-glucuronide, l’œstrone-3-bêta-D-glucuronide et l’œstriol-3-bêta-D-glucuronide.
• Klotho agit comme un corécepteur obligatoire de FGF23, essentiel à la liaison du facteur de croissance des fibroblastes 23 (FGF23) à FGFR1 et à la médiation du métabolisme rénal de la vitamine D ainsi que de la réabsorption du phosphate régulés par FGF23.
• Le domaine ectodomain soluble de Klotho libéré agit comme une hormone circulante anti-âge qui pourrait prolonger la durée de vie en inhibant la signalisation de l’insuline et de l’IGF1.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire apicale (isoforme liée à la membrane) et la sécrétion (isoforme soluble), permettant des fonctions autocrines, paracrines et endocrines.
• L’expression tissulaire est la plus élevée dans les reins, le placenta, l’intestin grêle et la prostate ; Klotho soluble est présent dans le sérum et le liquide céphalorachidien et est sous-exprimé dans certains cancers et dans les maladies rénales chroniques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, et la protéine appartient aux familles des glycosidases, des hormones et des hydrolases.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène utilisé couvre la région N-terminale (aa 1–200) de Klotho humain, commune aux isoformes membranaire et sécrétée ; il convient d’en tenir compte lors de la conception des essais de détection.
• Pour le Western blot (WB), Klotho migre autour de 116 kDa ; inclure des contrôles positifs provenant de lysats de rein, de placenta ou de prostate (humains, de souris ou de rats), car ces tissus expriment la protéine.
• Lors de la réalisation d’un ELISA, valider la spécificité de l’anticorps à l’aide de la protéine Klotho recombinante ou de liquides biologiques dans lesquels Klotho soluble est abondant, tels que le sérum ou le liquide céphalorachidien.
• Une réactivité croisée avec Klotho de souris et de rat est prévisible ; toutefois, un alignement des séquences et des essais préliminaires sont recommandés afin de confirmer une réactivité similaire chez ces espèces.
• Optimiser la dilution de l’anticorps et les conditions de détection pour chaque application ; les dilutions initiales typiques doivent être déterminées expérimentalement.

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