Anticorps polyclonal de lapin anti-Ki67 pour IF/ICC, ELISA - P46013

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du Ki67

• La protéine marqueur de prolifération Ki-67 (MKI67) s'associe à la surface des chromosomes mitotiques et agit à la fois comme répulsif de chromosomes lors de la mitose précoce et comme attractif lors de la mitose tardive. Références connexes : PMID:27362226, PMID:32879492, PMID:35513709
• Au début de la mitose, Ki-67 se relocalise des nucléoles vers la surface des chromosomes et forme des structures étendues en forme de brosse qui empêchent l'effondrement des chromosomes en fournissant une barrière stérique et électrostatique. Références connexes : PMID:27362226
• À l'anaphase mitotique, la déphosphorylation de Ki-67 et l'exposition d'un patch basique conservé induisent une séparation de phase liquide-liquide dépendante de l'ARN à la surface des chromosomes, favorisant le regroupement des chromosomes et l'exclusion des grandes particules cytoplasmiques du futur espace nucléaire. Références connexes : PMID:32879492, PMID:39153474, PMID:28935370
• Ki-67 se lie à l'ADN superenroulé et à l'ADN riche en AT, ainsi qu'aux ARN ribosomiques prématurés, ce qui contribue à son rôle dans l'organisation et la maintenance des chromosomes mitotiques. Références connexes : PMID:10878551, PMID:24867636
• La protéine se localise dans les noyaux des cellules en interphase, particulièrement concentrée dans les nucléoles, et s'associe aux chromosomes mitotiques lors de la division cellulaire (Localisation sous-cellulaire : Chromosome, Noyau, Nucléole).
• Ki-67 subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et les modifications de type ubiquitination (liaison isopeptidique, conjugaison Ubl), la phosphorylation/déphosphorylation régulant son association aux chromosomes et ses propriétés de séparation de phase. Références connexes : PMID:39153474

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 700-800 du Ki67 humain ; cette région se situe dans le domaine répétitif central et est susceptible d'être accessible dans la protéine native.
• Pour l'IF/ICC, envisagez d'optimiser la fixation et la perméabilisation cellulaires pour préserver la coloration des nucléoles et des chromosomes mitotiques. Les cellules en prolifération telles que HeLa ou Jurkat peuvent servir de témoins positifs.
• Pour l'ELISA, validez la réactivité de l'anticorps en utilisant des fragments recombinants de Ki67 ou des lysats cellulaires totaux de cellules proliférantes par rapport à des cellules quiescentes.
• Puisque l'anticorps reconnaît le Ki67 humain, une réactivité croisée avec d'autres espèces n'est pas attendue à moins qu'il n'y ait une forte homologie de séquence dans la région de l'immunogène.

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