Anticorps polyclonal de lapin anti-KEAP1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14145

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KEAP1

• KEAP1 (Kelch-like ECH-associated protein 1), également appelé INrf2 ou KLHL19, est une protéine cytoplasmique et nucléaire de 70 kDa qui agit comme adaptateur spécifique de substrat pour le complexe E3 ubiquitine ligase BCR (BTB-CUL3-RBX1).
• En conditions basales, KEAP1 cible le facteur de transcription NFE2L2/NRF2 pour son ubiquitination et sa dégradation protéasomique, réprimant ainsi l'expression des gènes cytoprotecteurs. Références associées : PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695 PMID:15601839 PMID:16006525
• En tant que capteur clé du stress oxydatif, KEAP1 contient des résidus cystéine hautement réactifs qui subissent une modification covalente non enzymatique par les électrophiles, entraînant l'inactivation du complexe ligase et l'accumulation nucléaire subséquente de NRF2. Références associées : PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• KEAP1 participe également à l'autophagie sélective en interagissant avec SQSTM1/p62 ; cela séquestre KEAP1 dans les corps d'inclusion, activant davantage NRF2, tout en médiant simultanément l'ubiquitination et la dégradation de SQSTM1/p62. Références associées : PMID:20452972 PMID:28380357
• D'autres substrats du complexe ubiquitine ligase contenant KEAP1 incluent BPTF et PGAM5, ce qui souligne ses rôles de régulation étendus. Références associées : PMID:15379550 PMID:17046835
• KEAP1 est largement exprimée dans les tissus humains, avec les niveaux les plus élevés trouvés dans le muscle squelettique ; la protéine contient des répétitions Kelch caractéristiques et un domaine BTB, et est sujette à des modifications post-traductionnelles notamment la S-nitrosylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 320 à 510 de la KEAP1 humaine ; cette région peut permettre la reconnaissance de la KEAP1 pleine longueur et potentiellement des épitopes conservés entre les espèces. Vérifiez la spécificité dans votre système d'échantillon.
• Pour le Western blot, attendez une bande correspondant au poids moléculaire prédit d'environ 70 kDa. Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), KEAP1 peut être détectée dans les compartiments cytoplasmique et nucléaire. Envisagez d'optimiser les étapes de fixation et de perméabilisation.
• La réactivité croisée rapportée inclut l'humain, la souris et le rat ; cependant, les performances pour chaque espèce doivent être validées avec des tissus ou des lignées cellulaires appropriés.
• Pour l'ELISA, l'immunogène de protéine recombinante suggère une utilisation potentielle dans des configurations de capture ou de détection ; confirmez l'affinité de liaison et la spécificité avec la protéine cible et les protéines de contrôle.

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