Anticorps polyclonal de lapin anti-KEAP1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q14145

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KEAP1

• KEAP1 (protéine Kelch-like ECH-associated 1), également connue sous le nom d'INrf2 ou KLHL19, fonctionne comme un adaptateur spécifique de substrat pour le complexe ligase E3 BCR (BTB-CUL3-RBX1). Références connexes : PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695
• Il sert de capteur redox critique en ciblant le facteur de transcription NFE2L2/NRF2 pour l'ubiquitination et la dégradation par le protéasome dans des conditions basales, maintenant ainsi de faibles niveaux d'expression des gènes cytoprotecteurs. Références connexes : PMID:15601839 PMID:16006525
• Lors d'un stress oxydatif ou électrophile, les résidus de cystéine réactifs de KEAP1 sont modifiés de manière covalente, inactivant le complexe ligase et permettant à NRF2 de s'accumuler dans le noyau et de stimuler l'expression des enzymes de détoxification de phase II. Références connexes : PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• Les voies d'autophagie sélective impliquant SQSTM1/p62 peuvent séquestrer KEAP1, conduisant à l'activation de NRF2 ; le complexe BCR(KEAP1) ubiquitine également SQSTM1/p62, améliorant sa propre dégradation. Références connexes : PMID:20452972 PMID:28380357
• Les substrats supplémentaires du complexe BCR(KEAP1) incluent BPTF et PGAM5, élargissant son rôle dans la régulation cellulaire. Références connexes : PMID:15379550 PMID:17046835
• KEAP1 est principalement cytoplasmique mais peut également se localiser dans le noyau, ce qui est cohérent avec ses fonctions régulatrices.
• Il est largement exprimé dans les tissus humains, les niveaux les plus élevés étant observés dans le muscle squelettique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la S-nitrosylation et l'ubiquitination, et il contient des domaines de répétition Kelch critiques pour la reconnaissance du substrat.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de KEAP1 est d'environ 70 kDa ; utilisez des témoins positifs appropriés à partir de lysats humains, de souris ou de rat pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence/ICC, envisagez d'optimiser les conditions de fixation et de perméabilisation pour détecter les pools cytoplasmiques et nucléaires de KEAP1.
• Pour les applications ELISA sandwich, il est recommandé de l'associer à un anticorps de capture validé ; validez la paire d'anticorps dans la matrice d'échantillon pertinente.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre peut varier ; il est conseillé de tester les nouveaux lots dans une expérience pilote avant les études à grande échelle.

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