Anticorps monoclonal de lapin Anti-KDM4B/JMJD2B pour WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - O94953

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KDM4B

• KDM4B, également appelé JMJD2B ou JHDM3B, est une lysine déméthylase spécifique 4B et un membre de la famille des histone déméthylases contenant le domaine Jumonji C (JmjC) (gène KDM4B/JMJD2B). C'est une enzyme modifiant la chromatine qui régule la transcription en éliminant les groupes méthyle des histones.
• Il déméthyle spécifiquement l'histone H3 triméthylée sur la lysine 9 (H3K9me3), produisant du formaldéhyde et du succinate au cours du processus. Il n'agit pas sur H3K4, H3K27, H3K36 ou H4K20. Comparé aux autres membres de la famille KDM4 (KDM4A, KDM4C, KDM4D), KDM4B présente une activité catalytique plus faible sur H3K9me3. Références associées : PMID:16603238 PMID:28262558
• Il joue un rôle essentiel dans le développement du système nerveux central (SNC), comme l'illustrent son implication dans les fonctions neurologiques et ses associations avec des pathologies.
• Il se localise principalement dans le noyau, ce qui est cohérent avec sa fonction dans la modification des histones et la régulation de la chromatine.
• Il contient plusieurs domaines conservés, notamment JmjC, JmjN, des doigts de zinc de type PHD et des domaines TUDOR, qui sont impliqués dans la liaison à la chromatine et l'activité catalytique. Il nécessite du fer et du zinc comme cofacteurs pour son activité dioxygénase.
• Il est soumis à des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité ou ses interactions. L'épissage alternatif génère de multiples isoformes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 50 à 150 de la région N-terminale de KDM4B humain. Cette région est distincte du domaine catalytique JmjC, et l'anticorps peut reconnaître plusieurs isoformes qui incluent cette séquence N-terminale.
• Pour le Western blotting, une bande proche de 122 kDa est attendue. Validez la spécificité à l'aide de lysats de contrôle positifs et négatifs appropriés, et prenez en compte la possibilité de détecter des variants d'épissage alternatif.
• Pour l'immunoprécipitation (IP) et l'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), réalisez des expériences pilotes pour optimiser la concentration d'anticorps et les conditions de réticulation. Utilisez des contrôles d'isotype IgG et validez l'enrichissement aux loci cibles connus de KDM4B.
• En immunofluorescence (IF/ICC), vérifiez la localisation nucléaire ; l'anticorps doit marquer principalement le noyau. La co-coloration avec des marqueurs nucléaires permet de confirmer la spécificité.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'homme, la souris et le rat. Pour d'autres espèces, confirmez l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène avant utilisation.

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