Anticorps monoclonal de lapin anti-KDM4A pour WB, IP, ELISA - O75164

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KDM4A

• La lysine déméthylase 4A spécifique (KDM4A), également appelée JMJD2A ou JHDM3A, est une histone déméthylase qui déméthyle spécifiquement les résidus 'Lys-9' triméthylés (H3K9me3) et 'Lys-36' triméthylés (H3K36me3) de l'histone H3, sans activité sur les résidus mono- ou diméthylés ni sur H3K4, H3K27 ou H4K20. Elle déméthyle également l'histone H1.4 au niveau du résidu 'Lys-26' (H1.4K26me1/me2/me3).
  Références associées : PMID:16603238, PMID:26741168, PMID:21768309, PMID:19144645, PMID:30156264
• KDM4A participe à la répression transcriptionnelle en recrutant les histones déacétylases (HDAC) et le co-répresseur NCOR1 sur les promoteurs sensibles à E2F et le promoteur ASCL2.
  Références associées : PMID:16024779
• Un isoforme musculaire spécifique de KDM4A dépourvu du domaine déméthylase N-terminal est crucial pour la différenciation musculaire ; il active la transcription du gène Myog en éliminant les marques chromatiniques répressives.
• KDM4A est localisée dans le noyau cellulaire.
• KDM4A est exprimée de manière ubiquitaire dans tous les tissus humains.
• La protéine appartient à la famille des histone déméthylases à domaine JmjC et contient des domaines à doigt de zinc. Elle est soumise à des modifications post-traductionnelles : acétylation, phosphorylation et ubiquitination. Son activité fait intervenir le fer et le zinc comme cofacteurs.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux résidus 382-459 de KDM4A humain, situé dans la région N-terminale. Vérifiez que l'anticorps détecte à la fois l'isoforme pleine longueur et l'isoforme musculaire spécifique dépourvu du domaine N-terminal en réalisant des tests sur des lysats cellulaires appropriés (par exemple, myoblastes vs myotubes).
• Pour le Western blot, une bande d'environ 121 kDa est attendue pour KDM4A pleine longueur ; validez l'essai en utilisant des extraits nucléaires de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat.
• Optimisez la dilution de l'anticorps pour chaque application (WB, IP, ELISA) en utilisant des échantillons de contrôle positif ; réalisez des expériences de titration pour déterminer la concentration de travail optimale.
• Pour l'immunoprécipitation, adaptez la méthode (méthode de réticulation ou protocole direct) en fonction de l'isotype de l'anticorps et de l'abondance de la cible.
• Incluez des contrôles appropriés (par exemple, contrôle d'isotype, lysats de cellules knock-out) pour confirmer la spécificité du signal.

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