Anticorps polyclonal de lapin anti-KDM1 (LSD1) pour WB, IHC-P - O60341

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de KDM1A

• KDM1A (également appelé LSD1, AOF2, BHC110) est une lysine déméthylase histonique dépendante du FAD qui élimine les marques mono- et diméthyl de l'histone H3 au niveau de la lysine 4 (H3K4me1/me2) et de la lysine 9 (H3K9me1/me2). Selon le contexte du promoteur, cette activité peut entraîner une répression ou une activation transcriptionnelle. Références associées : PMID:15620353, PMID:15811342, PMID:16079794
• La déméthylation de H3K4me sur les nucléosomes nécessite une interaction avec le corépresseur RCOR1/CoREST, ce qui relie KDM1A à la régulation de l'expression des gènes neuronaux et à la fonction du complexe REST. Références associées : PMID:16079794, PMID:16140033, PMID:16885027
• En présence du récepteur aux androgènes (RA), KDM1A agit comme coactivateur en déméthylant H3K9me, et cette fonction est modulée par la phosphorylation de la thréonine 6 de l'histone H3 (H3T6ph) par PRKCB. Références associées : PMID:16079795
• KDM1A déméthyle également des substrats non histoniques, notamment la lysine 370 de p53 (ce qui altère son interaction avec 53BP1), la méthyltransférase de l'ADN 1 (DNMT1) et le facteur de transcription SOX2, influençant ainsi la stabilité et la fonction des protéines. Références associées : PMID:29691401, PMID:29358331
• Il joue un rôle crucial dans le développement, étant nécessaire à la gastrulation, et dans l'hématopoïèse où il agit au sein d'un complexe RCOR/GFI/KDM1A/HDAC pour réguler la différenciation des cellules sanguines. Références associées : PMID:16079794, PMID:16140033
• KDM1A facilite la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM) en coopérant avec SNAI1 pour réprimer les marqueurs épithéliaux tels que l'E-cadhérine/CDH1, CDN7 et KRT8. Références associées : PMID:20562920, PMID:27292636, PMID:20389281
• Chez les neurones, un isoforme de KDM1A enrichi dans le cerveau déméthyle la lysine 20 de l'histone H4 (H4K20me1/me2) pour réguler l'expression génique dépendante de l'activité, un processus essentiel à l'apprentissage spatial et à la mémoire. Références associées : PMID:26214369
• KDM1A est principalement localisé dans le noyau et exprimé de manière ubiquitaire, avec une expression particulièrement élevée dans le cerveau et les testicules.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour l'analyse par Western blot, le poids moléculaire prédit de KDM1A est d'environ 93 kDa ; pensez à utiliser des marqueurs de poids moléculaire appropriés et à vérifier la spécificité de la bande avec des contrôles de knockdown ou de knockout.
• L'immunogène correspond aux résidus 130–380 de KDM1A humaine ; réalisez un alignement de séquence pour évaluer l'homologie de la cible lorsque vous utilisez des échantillons de souris ou de rat, car la réactivité croisée est indiquée mais peut varier selon l'application.
• En immunohistochimie (IHC-P), les coupes de tissu cérébral ou testiculaire peuvent servir de contrôles positifs compte tenu de la forte expression de KDM1A ; optimisez la récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps primaire de manière empirique.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), attendez une coloration nucléaire ; une fixation et perméabilisation correctes des cellules sont essentielles, et une co-coloration avec un marqueur nucléaire est recommandée.
• Lors d'une utilisation en ELISA, l'inclusion de contrôles positifs et négatifs est indispensable pour évaluer la spécificité et la linéarité de l'anticorps.

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