Anticorps polyclonal de lapin anti-KAL1 pour WB, IF-P, ELISA - P23352

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Anosmine-1 (KAL1)

• L'Anosmine-1, codée par le gène ANOS1 (également connu sous le nom de KAL1, ADMLX, KALIG1), est une molécule d'adhésion sécrétée et associée à la membrane cellulaire avec un poids moléculaire prédit d'environ 76 kDa. Elle appartient à la famille des protéines contenant un domaine WAP (Whey Acidic Protein) et présente des caractéristiques structurales d'un inhibiteur de sérine protéase.
• Dans le bulbe olfactif en développement, l'Anosmine-1 exerce une double activité de promotion des branches et de guidage sur les collatérales des cellules mitrales et en touffes, facilitant leur ciblage correct vers le cortex olfactif. Elle agit également comme un chimioattractant pour les cellules épithéliales olfactives fœtales.
• La protéine contient de multiples domaines, notamment un domaine WAP, des répétitions de type III de fibronectine et une région C-terminale présentant une homologie avec les inhibiteurs de sérine protéase, permettant des interactions avec l'héparine et les molécules de surface cellulaire.
• Au niveau subcellulaire, l'Anosmine-1 est localisée à la membrane cellulaire et est également sécrétée dans l'espace extracellulaire, ce qui correspond à ses rôles dans l'adhésion cellulaire et le chimiotactisme.
• Des études d'expression tissulaire ont confirmé la présence de la protéine Anosmine-1 dans le cervelet. Son expression dans le système olfactif en développement et d'autres régions souligne son importance neurodéveloppementale.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfure, qui sont critiques pour la stabilité et la fonction. La protéine contient également un peptide signal pour la sécrétion.
• Les mutations du gène ANOS1 sont associées au syndrome de Kallmann lié à l'X, un trouble du développement caractérisé par un hypogonadisme hypogonadotrope et une anosmie, mettant en évidence son rôle essentiel dans la migration neuronale et le développement du système olfactif.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 200–300 de KAL1 humain ; ainsi, l'anticorps reconnaît un épitope situé dans cette région. Confirmez l'accessibilité de l'épitope dans vos conditions d'essai spécifiques.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 76 kDa, mais la glycosylation et d'autres modifications peuvent entraîner un décalage ou des bandes multiples. Validez en utilisant des contrôles positifs appropriés (par exemple, un lysat de cervelet humain).
• En immunofluorescence, l'Anosmine-1 peut être détectée au niveau de la membrane plasmique et/ou dans les vésicules de sécrétion. Une perméabilisation avec du Triton X-100 ou de la saponine est recommandée pour visualiser les pools intracellulaires, mais notez que les formes sécrétées pourraient être perdues sans optimisation de la fixation.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Associez-le à un anticorps de détection validé dans un format ELISA sandwich, et testez-le contre de l'Anosmine-1 recombinante ou des échantillons biologiques pour établir les concentrations de travail.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée ; cependant, l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène doit être vérifiée pour assurer une détection cohérente entre les espèces.
• Cet anticorps polyclonal convient aux études sur le développement olfactif, la pathologie du syndrome de Kallmann et la migration cellulaire. Envisagez de le combiner avec d'autres marqueurs neuronaux pour une analyse multiplex.

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