Anticorps monoclonal de lapin anti-JAK1 pour WB et ELISA - P23458

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de JAK1

• JAK1 (JTK3 ; JAK1A) est une tyrosine kinase non réceptrice de 133 kDa appartenant à la famille des Janus kinases. Elle contient des domaines SH2 et kinase, ainsi que des activités tyrosine-protéine kinase et transférase.
• Elle phosphoryle et active les sous-unités de transduction du signal de divers récepteurs de cytokines, notamment ceux de l'IL-2, l'IL-10, l'IL-6, l'IL-31, l'IFN-alpha/bêta/gamma et les complexes récepteurs de l'oncostatine-M, initiant ainsi le recrutement et la signalisation des protéines STAT. Références associées : PMID:11909529, PMID:12133952, PMID:15194700, PMID:16239216, PMID:28111307, PMID:32750333, PMID:7759950, PMID:8232552, PMID:9188471
• Lors de la liaison de l'interféron, JAK1 phosphoryle IFNAR2, créant des sites d'ancrage pour les protéines STAT qui sont ensuite phosphorylées et se transloquent vers le noyau pour activer la transcription. Références associées : PMID:7759950, PMID:16239216, PMID:32750333, PMID:8232552
• Au-delà de la signalisation par l'interféron, JAK1 est nécessaire pour la phosphorylation de STAT3 induite par l'humanine/MT-RNR2, l'activation de STAT3 par CNTF/CLCF1 via LIFR/IL6ST, la signalisation de l'oncostatine-M via les récepteurs de type I et II, et la signalisation de l'Interleukine-31 via le complexe OSMR/IL31RA. Références associées : PMID:27384491, PMID:11294841, PMID:9188471, PMID:15194700
• Au niveau subcellulaire, JAK1 est associée au système endomembranaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans la signalisation des récepteurs de cytokines au niveau de la membrane plasmique et des compartiments intracellulaires.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et l'ubiquitination (conjugaison Ubl) ; le domaine kinase nécessite de l'ATP et des ions métalliques (Mg²⁺) pour son activité, et la protéine possède un domaine SH2 et des résidus phosphotyrosine.
• Les données de spécificité tissulaire indiquent une expression plus élevée dans les tumeurs primaires du côlon que dans le tissu colique normal, les tumeurs métastatiques présentant des niveaux d'expression comparables au tissu normal.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 600-700 de JAK1 humaine (P23458), une région qui peut faire partie du domaine pseudokinase ou du lien interdomaine ; envisagez de vérifier la spécificité de l'anticorps par compétition peptidique ou validation par knockout.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 133 kDa ; optimisez les contrôles de charge et les conditions de blocage pour minimiser la liaison non spécifique, en particulier dans les lysats d'immunoprécipitation ou complexes.
• En ELISA, assurez-vous que l'antigène de revêtement présente efficacement l'épitope ; testez une gamme de dilutions d'anticorps pour déterminer le rapport signal/bruit optimal.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est anticipée d'après les données du fournisseur, mais une validation dans des lysats de cellules ou de tissus spécifiques à l'espèce est recommandée.

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