Anticorps polyclonal de lapin anti-ITIH3 pour WB, ELISA - Q06033

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ITIH3

• L'ITIH3 (chaîne lourde H3 de l'inhibiteur inter-alpha-trypsine) est également connue sous le nom de protéine associée à l'hyaluronane dérivée du sérum (SHAP) et est codée par le gène ITIH3. Elle appartient à la famille des inhibiteurs inter-alpha-trypsine (ITI).
• L'ITIH3 peut fonctionner comme un transporteur d'hyaluronane (HA) dans le sérum ou comme une protéine de liaison qui relie le HA à d'autres protéines matricielles, y compris les protéines de surface cellulaire, régulant ainsi la localisation, la synthèse et la dégradation du HA — processus cruciaux pour la migration cellulaire et le remodelage tissulaire.
• La protéine est sécrétée et contient des domaines de chaîne lourde qui permettent une liaison covalente à l'hyaluronane via une liaison ester sérine, formant des complexes covalents avec le HA.
• L'ITIH3 est classée comme membre de la famille des inhibiteurs de sérine protéase (serpine), bien que son rôle principal soit dans l'organisation de la matrice extracellulaire plutôt que dans l'inhibition des protéases ; elle possède un peptide signal et plusieurs sites de glycosylation.
• L'épissage alternatif de l'ITIH3 produit de multiples isoformes, qui peuvent avoir des distributions tissulaires et des propriétés fonctionnelles distinctes.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la glycosylation N-liée, qui influence la stabilité et la fonction de la protéine.
• La protéine a un poids moléculaire prédit d'environ 99,8 kDa, cohérent avec la bande observée d'environ 100 kDa en western blot ; elle est exprimée dans le foie et sécrétée dans le plasma, avec une large distribution tissulaire en raison de son rôle dans le métabolisme de l'hyaluronane.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 35-180 de l'ITIH3 humain (NP_002208.3), une région probablement conservée entre les espèces, ce qui soutient la réactivité croisée signalée avec la souris et le rat.
• Pour le western blot (WB), envisagez une gamme de dilution de départ de 1:500 à 1:2000, bien que la dilution optimale doive être déterminée empiriquement dans le système d'échantillon cible. Une bande proche de 100 kDa est attendue ; des bandes supplémentaires peuvent refléter des isoformes ou des complexes.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réagent de détection ou de capture ; effectuez un titrage pour établir les concentrations de travail pour les formats directs ou en sandwich.
• Comme l'ITIH3 est une protéine sécrétée, le sérum, le plasma ou le surnageant de culture cellulaire peuvent être des types d'échantillons appropriés. Des étapes de prénettoyage ou d'enrichissement peuvent améliorer la détection.
• Validez les performances de l'anticorps dans l'application et l'espèce spécifiques d'intérêt avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.

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