Anticorps monoclonal anti-ITGA1/CD49a () pour FC - P56199

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'ITGA1/CD49a

• Identité de la protéine et isoformes : L'intégrine alpha-1 (ITGA1), également connue sous les noms de CD49a, sous-unité alpha de VLA-1 ou membre A de la famille des antigènes apparentés à CD49, est une glycoprotéine transmembranaire de type I à passage unique, codée par le gène ITGA1.
• Formation d'un hétérodimère : Elle s'associe de manière non covalente à l'intégrine bêta-1 (CD29) pour former le récepteur fonctionnel de la laminine et du collagène VLA-1 (very late antigen-1, antigène très tardif-1).
• Spécificité du ligand : Le complexe intégrine alpha-1/bêta-1 reconnaît la séquence hydroxylée sur la proline G-F-P-G-E-R du collagène et se lie également à la laminine.
• Rôle fonctionnel : L'ITGA1 assure une régulation négative de la croissance cellulaire dépendante de l'ancrage et stimulée par l'EGF, contribuant ainsi aux processus d'adhésion et de signalisation cellulaires.
• Localisation subcellulaire : La protéine est située dans la membrane cellulaire et possède un large domaine extracellulaire, une seule hélice transmembranaire et une courte queue cytoplasmique.
• Modifications post-traductionnelles et domaines : L'ITGA1 contient plusieurs domaines de liaison au calcium et au magnésium, des ponts disulfure et est fortement glycosylée. Elle comprend un peptide signal N-terminal et plusieurs régions répétées.
• Poids moléculaire : La protéine mature présente un poids moléculaire calculé d'environ 130 848 Da, correspondant à la bande d'environ 131 kDa observée dans des conditions réductrices.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre le vaste domaine extracellulaire (acides aminés 29–1141), ce qui suggère que l'anticorps se lie à un épitope extracellulaire accessible pour le marquage de cellules vivantes en cytométrie en flux, sans nécessiter de perméabilisation.
• Comme l'anticorps est directement conjugué à , aucun réactif de détection secondaire n'est nécessaire, ce qui simplifie le protocole de FC.
• Envisagez de titrer l'anticorps (par exemple, 0,1–1 µg par test) sur le type cellulaire cible afin de déterminer la concentration optimale de marquage. Utilisez un contrôle d'isotype approprié conjugué au même fluorophore pour évaluer la liaison non spécifique.
• Validez les performances de l'anticorps sur des échantillons humains exprimant ITGA1/CD49a, tels que des lymphocytes T activés, des cellules endothéliales ou certaines lignées cellulaires épithéliales.
• Pour le marquage de la surface cellulaire, utilisez des protocoles standards pour cellules vivantes ; évitez la fixation sauf si elle est nécessaire, car elle peut modifier l'accessibilité de l'épitope ou l'intensité du fluorophore.

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