Anticorps polyclonal Anti-ITCH pour WB, IHC-P, ELISA - Q96J02

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ITCH

• ITCH (E3 ubiquitine-protein ligase Itchy homolog, également connue sous les noms AIP4, AIF4, ADMFD, NAPP1) est une E3 ligase contenant un domaine HECT qui accepte l'ubiquitine des enzymes E2 et la transfère directement aux protéines substrats. Références associées : PMID:11046148, PMID:14602072, PMID:15051726
• Elle catalyse la conjugaison de polyubiquitine liée aux résidus Lys-29, Lys-48 et Lys-63, un processus essentiel au contrôle des voies de signalisation inflammatoires ; en tant que composant d'un complexe d'édition de l'ubiquitine avec TNFAIP3, TAX1BP1 et RNF11, ITCH assure une activation transitoire de NF-kappa-B en médiant la dégradation de RIPK1. Références associées : PMID:17028573, PMID:18718448, PMID:19131965
• ITCH régule l'activité transcriptionnelle de multiples facteurs (par ex. JUN, JUNB, NFE2) et de molécules de la réponse immunitaire (par ex. MAVS, RIPK2) par ubiquitination, influençant la production de cytokines Th2, le développement hématopoïétique et la signalisation antivirale. Références associées : PMID:16387660, PMID:18718448, PMID:19592251, PMID:19881509
• Localisée sur la membrane cellulaire, dans le cytoplasme, le noyau et les membranes endosomales, ITCH médie le tri des récepteurs (par ex. CXCR4, FZD4) en ubiquitinant les composants d'ESCRT-0 et PI4K2A, reliant l'ubiquitination au trafic endocytaire. Références associées : PMID:14602072, PMID:23146885, PMID:34927784
• ITCH favorise l'apoptose et l'équilibre redox en ciblant TXNIP pour une ubiquitination ramifiée avec UBR5, et médie la signalisation antiapoptotique de l'EGF via la dégradation de p15 BID. Références associées : PMID:20068034, PMID:20392206, PMID:29378950
• Elle inhibe la réplication du virus de la grippe A en catalysant l'ubiquitination liée au Lys-48 et la dégradation protéasomale de la protéine virale M1. Références associées : PMID:30328013
• ITCH est largement exprimée et soumise à acétylation, phosphorylation et épissage alternatif, avec un poids moléculaire d'environ 103 kDa.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspondant à la région N-terminale (aa 1-155) de l'ITCH humain, cet anticorps polyclonal est susceptible de détecter l'ITCH pleine longueur (~103 kDa) ainsi que les isoformes potentielles dans les lysats humains, de souris et de rat.
• Pour le WB, privilégiez des conditions réductrices et validez la spécificité de la bande en utilisant des lignées cellulaires de contrôle positif (par ex. Jurkat, HeLa) et un contrôle négatif (extinction par siRNA).
• Pour l'IHC-P, optimisez les méthodes de récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps sur des coupes de tissus connues pour exprimer ITCH.
• En ELISA, testez les formats directs ou de capture et confirmez la réactivité avec la protéine ITCH recombinante.
• Incluez toujours des contrôles appropriés adaptés à votre système expérimental.

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