Anticorps monoclonal lapin anti-IRF5 pour WB, IP, ELISA - Q13568

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'IRF5

• Le facteur régulateur de l'interféron 5 (IRF5) est un facteur de transcription codé par le gène IRF5 (également appelé SLEB10). Il appartient à la famille des IRF et contient un domaine de liaison à l'ADN qui reconnaît les éléments de réponse stimulés par l'interféron (ISRE).
• IRF5 fonctionne comme un régulateur central de l'immunité innée, activant l'expression des interférons de type I (IFN-α et IFN-β) et des cytokines inflammatoires en réponse aux récepteurs Toll-like endosomaux TLR7, TLR8 et TLR9. Références associées : PMID:11303025 PMID:15695821 PMID:22412986
• Il induit la transcription des gènes stimulés par l'IFN (ISG) en se liant à la séquence ISRE de leurs promoteurs, amplifiant ainsi les réponses antivirales.
• IRF5 est essentiel à la réponse interféron lors de l'infection par SARS-CoV-2, car il régule l'expression des effecteurs antiviraux. Références associées : PMID:33440148
• La localisation subcellulaire d'IRF5 est régulée dynamiquement : il navigue entre le cytoplasme et le noyau, et la translocation nucléaire est essentielle à son activité transcriptionnelle.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'ubiquitination (liaison isopeptidique) et la conjugaison à des protéines de type ubiquitine, modulent la stabilité et l'activité d'IRF5.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, contribuant à la diversité fonctionnelle et à la régulation tissu-spécifique.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond au domaine N-terminal de liaison à l'ADN (aa 6-151) de l'IRF5 humaine, ce qui indique que l'anticorps peut reconnaître cette région fonctionnelle ; prenez cela en compte lors de la conception d'expériences de cartographie d'épitopes.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit d'IRF5 est d'environ 56 kDa ; assurez une séparation adéquate et utilisez des contrôles appropriés pour confirmer l'identité de la bande.
• L'expression d'IRF5 est inductible après activation des TLR dans les cellules immunitaires ; envisagez de traiter les lignées cellulaires (par exemple THP-1, RAW 264.7) avec des agonistes de TLR pour améliorer la détection.
• Compte tenu de la réactivité croisée rapportée avec la souris, cet anticorps peut convenir pour des modèles murins ; cependant, validez ses performances dans le tissu ou le type cellulaire étudié.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), vérifiez l'efficacité de capture de l'anticorps dans des systèmes sur-exprimés ou endogènes, car IRF5 peut interagir avec d'autres protéines.
• En ELISA, une paire d'anticorps appariés peut être nécessaire ; envisagez de l'associer à un anticorps de détection ciblant un épitope non chevauchant.

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