Anticorps polyclonal de lapin anti-Irf3 pour WB, IHC-P, ELISA - P70671

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'Irf3

• Le facteur régulateur de l'interféron 3 (Irf3) est un régulateur transcriptionnel clé des réponses immunitaires innées dépendantes des interférons de type I (IFN), jouant un rôle essentiel dans la défense antivirale contre les virus à ADN et à ARN. Il régule la transcription des gènes d'IFN de type I (IFN-alpha et IFN-beta) et des gènes stimulés par l'IFN (ISG) en se liant aux éléments de réponse stimulés par l'interféron (ISRE) présents dans leurs promoteurs, agissant comme un activateur plus puissant d'IFNB que d'IFNA. Références associées :
  • PMID:15800576
  • PMID:39719712
• Dans les cellules non infectées, Irf3 existe sous forme de monomère cytoplasmique inactif. Après une infection virale, la présence d'ARN double brin (ARNd) ou la signalisation des récepteurs de type toll (TLR), il est phosphorylé par les kinases IKBKE et TBK1, ce qui induit un changement conformationnel entraînant la dimérisation, la translocation nucléaire et l'association avec CREBBP pour former le complexe DRAF1, qui active la transcription des gènes d'IFN de type I et des ISG. Irf3 peut également induire l'apoptose dans les macrophages primaires. Références associées :
  • PMID:16846591
  • PMID:16979567
  • PMID:20049431
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes d'Irf3 ; une isoforme peut agir comme modulateur, diminuant l'activité transcriptionnelle de l'isoforme 1 en entrant en compétition pour la liaison à l'ISRE.
• La localisation subcellulaire d'Irf3 inclut le cytoplasme, le noyau et les mitochondries, ce qui reflète sa navette dynamique lors de l'activation.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination (y compris la liaison isopeptidique et la conjugaison Ubl), qui régulent son activité, sa stabilité et ses interactions.
• Irf3 est largement exprimé dans tous les tissus, ce qui est cohérent avec son rôle étendu dans l'immunité innée.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 100-200 de l'Irf3 de souris ; cette région centrale est probablement conservée entre les espèces, ce qui explique la réactivité croisée observée avec l'homme et le rat. Envisagez un alignement de séquence pour vérifier la conservation de l'épitope si vous utilisez l'anticorps sur d'autres espèces.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 46 kDa. Utilisez des contrôles positifs et négatifs appropriés, tels que des lysats cellulaires stimulés versus non stimulés, pour confirmer la spécificité.
• En immunohistochimie (IHC-P), optimisez la récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps pour chaque type de tissu. La détection peut être améliorée dans les tissus présentant des réponses immunitaires activées.
• Pour l'ELISA, validez l'anticorps avec la protéine Irf3 recombinante ou des échantillons positifs connus. Associez-le à un anticorps de détection approprié pour le développement d'un ELISA sandwich.
• Compte tenu du rôle d'Irf3 dans l'immunité innée, envisagez de stimuler les cellules avec des mimétiques viraux (par exemple, poly(I:C)) ou des interférons pour surréguler l'expression de la cible et améliorer la détection.

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