Anticorps polyclonal anti-IRF3 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - Q14653

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IRF3

• L'IRF3 est un régulateur transcriptionnel clé des réponses immunitaires dépendantes de l'interféron (IFN) de type I, jouant un rôle crucial dans l'immunité innée contre les virus à ADN et à ARN. Références associées : PMID:22394562, PMID:24049179, PMID:25636800
• Il régule la transcription des gènes de l'IFN de type I (IFN-alpha et IFN-beta) et des gènes stimulés par l'IFN (ISG) en se liant à un élément de réponse stimulé par l'interféron (ISRE) dans leurs promoteurs. Références associées : PMID:11846977, PMID:16846591, PMID:16979567
• L'IRF3 est un activateur plus puissant du gène IFN-beta (IFNB) que du gène IFN-alpha (IFNA) et joue un rôle critique dans les phases précoces et tardives de l'induction des gènes IFNA/B. Références associées : PMID:16846591, PMID:16979567, PMID:20049431
• Présent sous une forme inactive dans le cytoplasme des cellules non infectées ; suite à une infection virale, à la présence d'ARN double brin (ARNdb) ou à la signalisation par les récepteurs de type Toll (TLR), il est phosphorylé par les kinases IKBKE et TBK1, induisant un changement conformationnel qui conduit à la dimérisation et à la localisation nucléaire. Références associées : PMID:22394562, PMID:25636800, PMID:27302953
• Dans le noyau, l'IRF3 s'associe à la protéine de liaison CREB (CREBBP) pour former le facteur 1 activé par l'ARNdb (DRAF1), un complexe qui active la transcription des gènes de l'IFN de type I et des gènes ISG. Références associées : PMID:16154084, PMID:27302953, PMID:33440148
• En réponse à une infection par le virus Sendai, l'IRF3 est recruté vers la mitochondrie et forme un complexe apoptotique TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAX, induisant l'apoptose. Références associées : PMID:25609812
• Exprimé de manière constitutive dans une variété de tissus.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (critique pour l'activation), l'acétylation et l'ubiquitination ; l'épissage alternatif génère des isoformes supplémentaires.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 100–200 de l'IRF3 humain (NP_001184051.1), une région située au sein du domaine N-terminal de liaison à l'ADN ; envisagez d'utiliser cette région pour la cartographie des épitopes ou des expériences de blocage.
• En Western blot, une bande à environ 47 kDa est attendue ; validez sur des lignées cellulaires pertinentes infectées par un virus ou stimulées par l'IFN pour confirmer l'expression.
• Une réactivité croisée avec l'IRF3 de souris et de rat est rapportée ; vérifiez l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène si vous utilisez ces espèces.
• Pour les applications ChIP, optimisez les conditions de réticulation et de sonication en raison du navettage nucléocytoplasmique dynamique de l'IRF3.
• Pour l'IF/ICC, utilisez des méthodes de fixation et de perméabilisation appropriées pour détecter la localisation à la fois cytoplasmique et nucléaire.

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