Anticorps polyclonal de lapin anti-IRE1 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - O75460

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IRE1

• L'IRE1 (ERN1) est une sérine/thréonine-protéine kinase et une endoribonucléase qui agit comme capteur essentiel de la réponse aux protéines dépliées (UPR) dans le réticulum endoplasmique (RE). Dans les cellules non stressées, son domaine luminal est lié par le chaperon HSPA5/BiP ; lors de l'accumulation de protéines mal pliées, HSPA5/BiP se dissocie, ce qui permet à l'IRE1 de s'homodimériser, de s'autophosphoryler et d'activer son domaine endoribonucléase. Références associées : PMID:11175748, PMID:11779464, PMID:12637535, PMID:21317875

• L'endoribonucléase activée clive spécifiquement l'ARNm XBP1, en excisant un intron de 26 nucléotides pour générer un transcrit épissé qui code un activateur transcriptionnel puissant qui induit l'expression des gènes cibles de l'UPR. Références associées : PMID:11779464, PMID:21317875, PMID:24508390

• L'IRE1 participe également au trafic non conventionnel induit par le stress du RE du CFTR vers la membrane cellulaire en modulant l'expression et la localisation de SEC16A. Références associées : PMID:21884936, PMID:28067262

• L'IRE1 est une protéine membranaire de type I à passage unique, majoritairement localisée dans la membrane du réticulum endoplasmique.

• Elle est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, avec des niveaux élevés observés dans le pancréas.

• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment l'autophosphorylation, l'ADP-ribosylation, la glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui régulent son activité.

• La masse moléculaire calculée de la protéine entière est d'environ 110 kDa (UniProt : 109,7 kDa ; fournisseur : 110 kDa).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 286 à 435 de la région cytoplasmique de l'IRE1 humaine, qui inclut une partie du domaine kinase. Cette région est bien conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui correspond à la réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 110 kDa est attendue ; utilisez des conditions réductrices et validez avec des témoins de charge appropriés et des inducteurs de stress du RE (par exemple tunicamycine, thapsigargine) pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et en immunohistochimie (IHC-P), la protéine est localisée dans le réticulum endoplasmique ; une perméabilisation est nécessaire, et une co-coloration avec des marqueurs du RE peut faciliter la validation.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser l'anticorps comme réactif de capture ou de détection et validez les performances avec l'IRE1 recombinant ou des lysats cellulaires d'échantillons traités vs non traités.

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