Anticorps monoclonal lapin anti-IRAK4 pour WB, ELISA - Q9NWZ3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IRAK4

• L'interleukin-1 receptor-associated kinase 4 (IRAK4), également appelé antigène du carcinome rénal NY-REN-64, est codée par le gène IRAK4 chez l'homme.
• Serine/threonine-protéine kinase jouant un rôle essentiel dans l'initiation de la réponse immunitaire innée contre les pathogènes étrangers ; impliquée dans les voies de signalisation des récepteurs Toll-like (TLR) et IL-1R (PubMed:17878374). Références associées : PMID:17878374
• Après activation du TLR, l'IRAK4 est rapidement recrutée par MYD88 pour former le complexe Myddosome avec l'IRAK2, où elle phosphoryle et stimule l'activité kinase de l'IRAK1.
• Elle phosphoryle les ligases d'ubiquitine E3 de la famille Pellino (PELI1, PELI2, PELI3) pour promouvoir la polyubiquitination de l'IRAK1, permettant la liaison à IKBKG/NEMO et l'activation subséquente de NF-kappa-B via le complexe IKK.
• De plus, elle phosphoryle TIRAP pour favoriser son ubiquitination et sa dégradation, et régule l'activation de la NADPH oxydase par phosphorylation de NCF1.
• Sa localisation sous-cellulaire est cytoplasmique.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes ; la protéine est associée à des variants pathologiques tels que l'immunodéficience (IMD67) et contient des motifs essentiels pour l'activité kinase (liaison à l'ATP, magnésium, liaison au nucléotide).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène (acides aminés 1-200 de l'extrémité N-terminale) couvre une partie du domaine kinase ; l'anticorps peut détecter la protéine IRAK4 totale avec un poids moléculaire prédit d'environ 52 kDa.
• Validé par KD pour le Western blot, cet anticorps peut être utilisé pour confirmer l'efficacité de knockdown ou détecter l'IRAK4 endogène dans des lysats de cellules humaines.
• Pour les applications ELISA, les formats direct ou par capture sont possibles ; les utilisateurs doivent optimiser les conditions de revêtement et réaliser la validation dans les systèmes d'échantillons concernés.
• Il est recommandé d'utiliser des lignées de cellules immunitaires humaines (par exemple THP-1, Jurkat) stimulées par des agonistes TLR pour induire l'expression d'IRAK4 et évaluer l'activation de la voie de signalisation.

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