Anticorps Polyclonal Anti-IRAK4 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9NWZ3

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'IRAK4

• IRAK4 (Interleukin-1 receptor-associated kinase 4) est une sérine/thréonine kinase essentielle pour la signalisation immunitaire innée, codée par le gène IRAK4 chez l'homme. Elle est également connue sous le nom d'antigène du carcinome rénal NY-REN-64.
• Lors de l'activation des récepteurs Toll-like (TLR) ou du récepteur de l'interleukine-1 (IL-1R), l'IRAK4 est recrutée par MYD88 pour former le complexe Myddosome avec IRAK2, initiant la transduction du signal en aval. Références connexes : PMID:17878374
• IRAK4 phosphoryle IRAK1, qui subit ensuite une autophosphorylation et forme un complexe avec TRAF6 et TAK1 ; elle phosphoryle également les protéines Pellino (PELI1, PELI2, PELI3) pour promouvoir la polyubiquitination d'IRAK1, conduisant finalement à la translocation nucléaire de NF-κB et à l'activation de l'expression des gènes inflammatoires.
• Alternativement, IRAK4 phosphoryle TIRAP pour promouvoir son ubiquitination et sa dégradation, et phosphoryle NCF1 pour réguler l'activation de la NADPH oxydase après stimulation par LPS, suggérant un rôle dans les réponses microbicides.
• Au niveau subcellulaire, l'IRAK4 se localise principalement dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec sa fonction dans l'assemblage du signalosome à proximité de la membrane.
• Les mots-clés associés à l'IRAK4 incluent kinase, liaison de nucléotides, magnésium, acétylation, épissage alternatif et variants de maladie ; les mutations d'IRAK4 sont liées à des troubles d'immunodéficience primaire tels que IPD1 et IMD67, caractérisés par une sensibilité accrue aux infections bactériennes pyogènes.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'anticorps a été élevé contre un fragment N-terminal (aa 1-200) couvrant le domaine de mort de l'IRAK4 humain ; il peut reconnaître à la fois l'isoforme pleine longueur et les isoformes tronquées au N-terminal si elles sont présentes.
• Pour le Western blotting, attendez-vous à une bande à environ 52 kDa dans les lysats de lignées cellulaires humaines, de souris ou de rat ; le poids moléculaire peut varier légèrement en raison de la phosphorylation ou des conditions de gel.
• En immunofluorescence/ICC, une localisation cytoplasmique doit être observée ; utilisez des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés.
• Pour ELISA, envisagez un titrage de l'anticorps et optimisez la concentration de l'antigène de revêtement pour obtenir le meilleur rapport signal/bruit.
• La réactivité croisée avec l'IRAK4 de souris et de rat est indiquée par le fournisseur ; une validation dans les systèmes d'échantillons spécifiques est recommandée avant les études à grande échelle.
• Pour étudier l'activation de l'IRAK4, stimulez les cellules avec de l'IL-1β ou des ligands TLR (ex: LPS) et évaluez l'état de phosphorylation ou la formation de complexes par co-immunoprécipitation.

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