Anticorps monoclonal anti-Intégrine alpha 5 (ITGA5/CD49e) () pour cytométrie en flux - P08648

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'ITGA5/CD49e

• L'intégrine alpha-5 (ITGA5) est une protéine transmembranaire de type I, également connue sous les noms de CD49e, chaîne alpha de VLA-5 et sous-unité alpha du récepteur de la fibronectine.
• ITGA5 s'associe à l'intégrine bêta-1 (ITGB1) pour former le récepteur de la fibronectine, qui se lie à la séquence RGD de la fibronectine et du fibrinogène, assurant ainsi l'adhésion et la signalisation cellulaires (PubMed:18635536, PubMed:25398877, PubMed:33962943).
  Références associées :
  PMID:18635536 PMID:25398877 PMID:33962943
• ITGA5:ITGB1 agit également comme récepteur de la fibrilline-1 (FBN1) et assure l'adhésion cellulaire à FBN1 dépendante de la séquence RGD (PubMed:12807887, PubMed:17158881).
  Références associées :
  PMID:12807887 PMID:17158881
• ITGA5:ITGB1 participe à la signalisation des cytokines, en servant de récepteur pour IL1B (via ITGA5:ITGB1) et pour le CD40LG soluble (via ITGA5:ITGB3) (PubMed:29030430, PubMed:31331973).
  Références associées :
  PMID:29030430 PMID:31331973
• Dans les interactions entre agents pathogènes et hôtes, ITGA5:ITGB1 agit comme récepteur du métapneumovirus humain et de la protéine Tat du VIH-1, facilitant l'entrée virale ou l'angiogenèse.
• Au niveau subcellulaire, ITGA5 se localise sur la membrane cellulaire et aux jonctions cellulaires, en particulier dans les adhérences focales, où elle relie la matrice extracellulaire au cytosquelette d'actine.
• Modifications post-traductionnelles : ITGA5 subit un clivage au niveau d'une paire de résidus basiques, générant des chaînes lourde et légère, et est N-glycosylée et phosphorylée, ce qui peut réguler son activité.
• Selon UniProt, ITGA5 est exprimée au niveau protéique dans le placenta, mais peut également être présente dans d'autres tissus.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène utilisé couvre les acides aminés 42 à 995, englobant presque tout le domaine extracellulaire. Cet anticorps est susceptible de reconnaître la conformation native, ce qui le rend adapté à la détection de l'ITGA5 à la surface cellulaire par cytométrie en flux.
• L'anticorps est directement conjugué à , un fluorophore brillant, ce qui élimine la nécessité d'un marquage secondaire et réduit le bruit de fond. Optimisez la concentration de l'anticorps par titrage sur la lignée cellulaire cible ou l'échantillon d'intérêt.
• Validez la réactivité dans les systèmes humain et murin, car une réactivité croisée est indiquée. Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, des cellules connues pour exprimer l'intégrine α5 et un contrôle isotypique) dans votre panel de cytométrie en flux.
• Pour les étapes de fixation et de perméabilisation, vérifiez si l'anticorps reconnaît l'épitope dénaturé ; dans le cas contraire, il est recommandé d'effectuer un marquage de surface.
• L'intégrine α5 étant impliquée dans l'adhésion et la signalisation, envisagez d'utiliser cet anticorps conjointement avec des essais fonctionnels afin de corréler l'expression de surface à l'activité.

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