Anticorps monoclonal anti-intégrine alpha 4 (ITGA4/CD49d) pour WB, IHC-P, ELISA - P13612

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'intégrine alpha 4

• L'intégrine alpha 4 (ITGA4, CD49d) forme des hétérodimères avec l'intégrine bêta 1 (ITGB1) pour constituer VLA-4, et avec l'intégrine bêta 7 pour constituer LPAM-1, agissant comme récepteur de la fibronectine, de VCAM1 et de MADCAM1.
• Par l'intermédiaire de VLA-4, l'ITGA4 reconnaît la séquence Q-I-D-S de VCAM1, tandis que l'alpha-4/bêta-7 reconnaît la séquence L-D-T de MADCAM1, ce qui intervient dans le roulement, l'adhésion ferme et la transmigration des leucocytes.
• L'ITGA4:ITGB1 se lie à la fractalkine (CX3CL1) et peut agir comme son corécepteur dans la signalisation dépendante de CX3CR1. Références associées : PMID:23125415
• L'ITGA4:ITGB1 se lie à la PLA2G2A via un site distinct, induisant des changements conformationnels de l'intégrine qui renforcent la liaison au ligand. Références associées : PMID:18635536, PMID:25398877
• Dans les cellules musculaires lisses vasculaires, l'ITGA4:ITGB1 réprime l'afflux via les canaux calciques de type L dépendants du voltage, médié par la PRKCA, ainsi que la sensibilité au calcium médiée par ROCK, par interaction avec SVEP1, inhibant ainsi la vasoconstriction. Références associées : PMID:35802072
• L'ITGA4 est exprimée sur la plupart des leucocytes et joue un rôle essentiel dans le trafic des cellules immunitaires ; elle est également exprimée au niveau protéique dans les cellules musculaires lisses vasculaires.
• La localisation subcellulaire se situe principalement au niveau de la membrane plasmique, où elle agit comme une protéine membranaire de type I à passage unique.
• Les mots-clés incluent l'épissage alternatif, l'adhésion cellulaire, l'intégrine, le récepteur, le calcium, la liaison aux métaux, la phosphoprotéine, la glycoprotéine et le pont disulfure, mettant en évidence ses fonctions et sa régulation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Comme l'immunogène couvre la région C-terminale (aa 933-1032), l'anticorps devrait reconnaître la protéine d'intégrine alpha-4 complète (environ 115 kDa) en WB. Validez la taille de la bande à l'aide de marqueurs de poids moléculaire et de témoins de charge appropriés.
• Pour l'IHC-P, nous suggérons de tester les méthodes standard de récupération antigénique, par exemple un tampon citrate à pH 6,0, et d'optimiser les protocoles de fixation afin de préserver les épitopes membranaires.
• En ELISA, associez-le à un anticorps de capture/de détection approprié et confirmez sa spécificité à l'aide de la protéine ITGA4 recombinante ou de lysats cellulaires.
• Compte tenu de sa réactivité croisée avec la souris, cet anticorps peut être envisagé pour l'étude de tissus murins ; toutefois, nous recommandons de réaliser des expériences pilotes afin de confirmer sa réactivité dans votre modèle expérimental spécifique.
• Les intégrines étant glycosylées et pouvant former des ponts disulfure, envisagez des conditions réductrices et non réductrices en WB afin d'évaluer une éventuelle dimérisation.

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