Anticorps polyclonal de lapin anti-récepteur de l'insuline pour WB, IP, ELISA - P06213

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur de l'insuline

• Le récepteur de l'insuline (INSR) est un récepteur tyrosine kinase qui initie des cascades de signalisation intracellulaire après liaison de l'insuline, régulant les processus métaboliques et mitogènes.
• La liaison de l'insuline déclenche la phosphorylation des substrats du récepteur de l'insuline (IRS1-4) et des adaptateurs (SHC, GAB1), conduisant à l'activation de la voie PI3K-AKT/PKB (actions métaboliques) et de la voie Ras-MAPK (croissance et différenciation cellulaire).
• La voie PI3K-AKT favorise l'absorption du glucose via la translocation de SLC2A4/GLUT4 et régule l'expression des enzymes gluconéogéniques et lipogéniques par les facteurs de transcription FOXO ; elle active également mTORC1 pour contrôler la synthèse protéique et la croissance cellulaire.
• L'INSR existe sous deux isoformes issues d'épissage alternatif (longue et courte) ; l'isoforme courte présente une affinité plus élevée pour l'IGFII. Des récepteurs hybrides avec l'IGF1R peuvent lier l'IGF1 et les IGF avec des affinités variées.
• Les récepteurs hybrides composés d'IGF1R et de l'isoforme longue de l'INSR sont activés avec une haute affinité par l'IGF1 mais pas significativement par l'insuline (PubMed : 12138094). Références associées : PMID : 12138094
• Inversement, des études montrent que les récepteurs hybrides des deux isoformes présentent des caractéristiques de liaison similaires, chacun liant l'IGF1 avec une faible affinité pour l'insuline (PubMed : 16831875). Références associées : PMID : 16831875
• L'INSR est principalement localisé sur la membrane cellulaire et circule à travers les endosomes tardifs et les lysosomes, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transduction du signal et le recyclage des récepteurs.
• L'expression tissulaire est la plus élevée dans les tissus cibles de l'insuline (foie, tissu adipeux, muscle squelettique) et est également détectée dans divers autres tissus ; le récepteur est fréquemment sur-exprimé dans les tumeurs, notamment les carcinomes du sein, du côlon et du poumon.
• L'INSR est synthétisé sous forme de pro-récepteur et subit un clivage protéolytique en sous-unités α et β ; il est en outre régulé par phosphorylation, liaisons disulfure, S-nitrosylation et ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1281-1382 de la région C-terminale de l'INSR humain (NP_000199.2). Envisagez de vérifier la spécificité vis-à-vis de cet épitope par des tests de compétition par peptide si nécessaire.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 156 kDa (pro-récepteur) ; cependant, dans des conditions réductrices, les sous-unités traitées α (~135 kDa) et β (~95 kDa) peuvent également être détectées. Optimisez la préparation des échantillons en conséquence.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec l'INSR humain, de souris et de rat comme indiqué ; validez la réactivité dans votre système expérimental spécifique à l'aide de contrôles positifs et négatifs.
• En immunoprécipitation, utilisez une concentration d'anticorps appropriée et assurez une élution efficace pour préserver les interactions protéiques en vue de l'analyse en aval.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une titration de l'anticorps et des conditions de dosage ; envisagez d'utiliser des étalons connus pour l'étalonnage.

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