Anticorps monoclonal anti-INSR/IGF1R pour WB et ELISA - P06213 / P08069

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d'INSR/IGF1R

• INSR code le récepteur de l'insuline, une récepteur tyrosine kinase qui médie les actions pléiotropes de l'insuline. Cet anticorps présente également une réactivité croisée avec le récepteur du facteur de croissance insulinomimétique de type 1 (IGF1R), étroitement apparenté.
• Lors de la liaison de l'insuline, l'INSR phosphoryle les substrats du récepteur de l'insuline (IRS1-4), SHC, GAB1 et CBL, activant deux cascades de signalisation principales : la voie PI3K-AKT (actions métaboliques telles que la translocation de GLUT4 et l'anti-apoptose) et la voie Ras-MAPK (croissance et différenciation cellulaires).
• L'INSR peut former des récepteurs hybrides avec l'IGF1R, qui lient l'IGF1, l'IGF2 et l'insuline avec des affinités dépendant de l'isoforme d'INSR (Longue vs. Courte). Ces hybrides se trouvent dans de nombreux tissus et peuvent contribuer à la complexité de la signalisation. Références associées : PMID:12138094 PMID:16831875
• Localisé principalement à la membrane cellulaire, le récepteur est internalisé dans les endosomes tardifs et les lysosomes après stimulation par le ligand, une étape clé pour l'atténuation du signal et le recyclage du récepteur.
• Exprimé de façon prédominante dans les tissus cibles classiques de l'insuline (foie, tissu adipeux, muscle squelettique), mais également présent dans le nerf périphérique, le rein, le placenta et divers types de cellules sanguines. Une surexpression est rapportée dans les carcinomes du sein, du côlon, du poumon, de l'ovaire et de la thyroïde.
• Le récepteur subit d'importantes modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation, la formation de ponts disulfure, le clivage protéolytique en sous-unités α/β et la phosphorylation, les mots-clés soulignant la liaison de l'ATP, l'activité kinase et la signalisation transmembranaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, envisagez des lysats de tissus sensibles à l'insuline (p. ex. foie, muscle, tissu adipeux). La forme précurseur migre à ~156 kDa, tandis que la sous-unité β clivée peut apparaître près de 95 kDa en conditions réductrices. Validez dans le système d'échantillons concerné.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection. L'immunogène se situant dans la région C-terminale de la sous-unité β (résidus 1100-1200), il peut reconnaître à la fois le récepteur de pleine longueur et la chaîne β traitée. Testez la compatibilité avec les anticorps de détection.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec l'INSR/IGF1R humain, murin et de rat. Confirmez la spécificité pour la cible visée à l'aide de contrôles appropriés (p. ex. lysats de cellules en knockdown ou knockout) afin de distinguer les signaux d'INSR de ceux d'IGF1R.
• En tant qu'anticorps monoclonal de lapin, ce réactif offre une constance d'un lot à l'autre. Pour les applications quantitatives, incluez des contrôles de charge appropriés et tenez compte du fait que les modifications post-traductionnelles peuvent affecter la migration ou l'accessibilité de l'épitope.

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