Anticorps monoclonal anti-iNOS pour WB, IF/ICC, ELISA - P35228

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'iNOS

• Encodée par le gène NOS2 (également appelé iNOS, NOS2A, HEP-NOS), cette oxyde nitrique synthase inductible est une enzyme clé de la famille des NOS, exprimée dans de nombreux tissus dont le foie, la rétine, l'os et l'épithélium des voies aériennes.
• Elle produit de l'oxyde nitrique (NO), une molécule messagère polyvalente impliquée dans de nombreux processus allant de la vasodilatation à la défense immunitaire (PubMed:7504305, PubMed:7531687, PubMed:7544004). Références associées : PMID:7504305 PMID:7531687 PMID:7544004
• Dans les macrophages, le NO médie les activités tumoricides et bactéricides, contribuant à l'immunité innée.
• Elle agit comme peptidyl-cystéine S-nitrosylase, médiant la S-nitrosylation de cibles cytoplasmiques telles que PTGS2/COX2 (par similarité) et GAPDH (PubMed:25417112). En tant que composant du complexe transnitrosylase iNOS-S100A8/9, elle S-nitrosyle sélectivement GAPDH au niveau du Cys-247, modulant l'activité du complexe GAIT et les réponses inflammatoires. Références associées : PMID:25417112
• Elle augmente la synthèse des médiateurs pro-inflammatoires IL6 et IL8, amplifiant davantage les cascades inflammatoires (PubMed:19688109). Références associées : PMID:19688109
• Elle est principalement localisée dans le cytoplasme/cytosol, où elle interagit avec la calmoduline et d'autres cofacteurs pour son activité enzymatique.
• Elle est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l'ubiquitination, et nécessite plusieurs cofacteurs tels que l'hème, le FAD, le FMN, le NADP et le zinc pour sa fonction catalytique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Le poids moléculaire prédit est de 131 kDa ; pour le Western blot, une bande proche de cette taille est attendue. Utilisez des conditions réductrices et validez avec un contrôle positif approprié (par exemple, macrophages RAW264.7 de souris stimulés par LPS/IFN-γ).
• Pour l'immunofluorescence, fixez les cellules en douceur et envisagez une co-coloration avec un marqueur cytoplasmique. Vérifiez l'expression dans votre système, car l'iNOS est inductible.
• Pour les applications ELISA, assurez-vous que la paire d'anticorps de capture/détection est compatible ; la nature monoclonale de cet anticorps peut fournir une spécificité constante.

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