Anticorps monoclonal de lapin anti-IL1β pour WB, IF/ICC, ELISA - P10749

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IL1β

• L'interleukine-1 bêta (IL1β) est une cytokine pro-inflammatoire puissante appartenant à la famille des interleukines-1, codée par le gène Il1b chez la souris (ID gène : 16176, UniProt P10749). La protéine est synthétisée sous forme de précurseur de 31 kDa qui est clivé pour générer une forme mature sécrétée.
• L'IL1β a été initialement identifiée comme le principal pyrogène endogène, capable d'induire de la fièvre. Elle stimule la synthèse des prostaglandines, favorise l'afflux et l'activation des neutrophiles, et régule à la fois les fonctions des lymphocytes T et B, pilotant les réponses immunitaires adaptatives.
• L'IL1β joue un rôle central dans la cascade inflammatoire : elle agit en synergie avec l'IL12 pour induire la production d'interféron-gamma (IFNG) par les cellules Th1, et favorise la différenciation des Th17. Elle facilite également l'angiogenèse en induisant la production de VEGF en combinaison avec le TNF et l'IL6.
• La forme mature de l'IL1β est libérée hors de la cellule par une voie de sécrétion non classique. Lors de l'activation de l'inflammasome et de la pyroptose, l'IL1β mature sort passivement par les pores de la gasdermine-D (GSDMD) dans la membrane plasmique, reliant la détection immunitaire innée à l'inflammation.
• Au niveau subcellulaire, l'IL1β se trouve dans le cytosol et les lysosomes, et elle est activement sécrétée. Elle est également associée aux exosomes extracellulaires, ce qui indique de multiples voies de sécrétion (UniProt : LOCALISATION SUBCELLULAIRE).
• L'expression de l'IL1β est étroitement régulée et majoritairement observée dans les macrophages activés au niveau protéique, ce qui est cohérent avec son rôle dans l'immunité innée (UniProt : SPÉCIFICITÉ TISSULAIRE).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 118-269 du précurseur de l'IL1β de souris (NP_032387.1), couvrant la région de l'IL1β mature. L'anticorps peut reconnaître à la fois le précurseur d'environ 31 kDa et la forme mature d'environ 17 kDa selon l'échantillon et l'état d'activation. Il est recommandé d'utiliser des marqueurs de poids moléculaire appropriés et des contrôles positifs (par exemple, lysats de macrophages stimulés par LPS) pour identifier les bandes spécifiques.
• Pour le Western blot (WB), utilisez un SDS-PAGE réducteur et des protocoles de transfert standard. Une bande d'environ 31 kDa est attendue pour le précurseur pleine longueur, tandis qu'une bande d'environ 17 kDa peut apparaître dans des échantillons sécrétés ou clivés.
• En immunofluorescence/ICC (IF/ICC), incluez des contrôles de stimulation (par exemple, LPS ± ATP) pour induire l'expression et la sécrétion d'IL1β, car les niveaux basaux peuvent être faits. Un co-marquage avec des marqueurs d'organites peut aider à visualiser sa localisation cytosolique ou sécrétée.
• Pour l'ELISA, envisagez d'associer cet anticorps à un anticorps de détection adapté reconnaissant un épitope distinct si vous l'utilisez comme réactif de capture. Validez le test avec des standards d'IL1β recombinante de souris et des échantillons biologiques.
• La réactivité croisée est confirmée pour la souris ; réalisez une validation spécifique à l'espèce si vous l'utilisez sur d'autres espèces. Les IgG endogènes de souris peuvent produire un bruit de fond dans les tissus de souris ; l'utilisation d'anticorps secondaires anti-lapin et d'un blocage approprié permet de réduire ce phénomène.

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