Anticorps polyclonal anti-IL12A pour WB, ELISA - P29459

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IL12A

• L'IL12A (sous-unité alpha de l'interleukine-12, également connue sous le nom de p35, CLMF, NFSK, NKSF1) est une sous-unité de cytokine qui forme l'interleukine-12 bioactive (IL-12) en s'hétérodimérisant avec l'IL12B (p40) et l'interleukine-35 (IL-35) en s'associant à EBI3/IL27B. Références associées : PMID:8605935, PMID:8943050
• L'IL-12 est principalement sécrétée par les cellules présentatrices d'antigène (lymphocytes B, cellules dendritiques, macrophages, granulocytes) et régule de manière critique les réponses des lymphocytes T et des cellules tueuses naturelles (NK), induit la production d'interféron-gamma (IFN-γ) et favorise la différenciation des lymphocytes T auxiliaires de type 1 (Th1), faisant le lien entre l'immunité innée et adaptative. Références associées : PMID:1673147, PMID:1674604, PMID:8605935
• Le récepteur de l'IL-12 est composé des sous-unités IL12R1 et IL12R2 ; la liaison du ligand déclenche la phosphorylation de tyrosine et l'activation des kinases de la famille JAK, TYK2 et JAK2, qui phosphorylent ensuite STAT4, conduisant à sa translocation nucléaire et à la régulation des gènes cibles. Références associées : PMID:8943050, PMID:7528775, PMID:7638186
• En tant que composante de l'IL-35, l'IL12A médie des fonctions immunosuppressives essentielles au maintien de l'homéostasie immunitaire du foie, signalant via des récepteurs non conventionnels composés d'hétérodimères IL12RB2 et gp130/IL6ST ou d'homodimères, et nécessitant de manière unique des hétérodimères STAT1–STAT4 pour la signalisation en aval. Références associées : PMID:22306691
• L'IL12A est sécrétée et subit des modifications co- et post-traductionnelles, notamment la glycosylation et la formation de ponts disulfure, qui sont importantes pour le repliement correct et la stabilité de l'hétérodimère IL-12.
• La protéine est hautement conservée entre l'humain, la souris et le rat, ce qui en fait une cible appropriée pour des études inter-espèces.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps polyclonal de lapin a été généré contre un peptide synthétique couvrant les acides aminés 50–150 de l'IL12A humaine (NP_000873.2). Il est censé reconnaître à la fois la sous-unité IL12A monomère et, dans des conditions non réductrices, éventuellement l'hétérodimère IL-12 p70.
• Pour le Western blot, une bande correspondant à la protéine IL12A de 25 kDa est attendue dans les lysats de tissus ou de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat (par exemple, cellules dendritiques activées, macrophages). Optimisez la préparation des échantillons pour conserver la forme sécrétée ; incluez des contrôles appropriés.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection de l'IL-12 native ou recombinante, mais un titrage minutieux et un appariement avec un anticorps de détection compatible sont recommandés.
• En raison de sa nature polyclonale, la cohérence d'un lot à l'autre doit être validée dans le système expérimental pertinent avant des études à grande échelle.

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