Anticorps monoclonal anti-IL-31 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q6EBC2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IL-31

• L'interleukine-31 (IL-31) est une cytokine sécrétée qui signale via un complexe récepteur hétérodimérique composé du récepteur de l'oncostatine M (OSMR) et du récepteur A de l'IL-31 (IL31RA) (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Références associées : PMID:15184896 PMID:15627637
• Lors de la liaison du ligand, l'IL31RA hétérodimérise avec l'OSMR, entraînant l'activation des kinases Janus JAK1 et JAK2, qui phosphorylent les résidus tyrosine des sous-unités du récepteur, créant des sites d'ancrage pour les facteurs de transcription STAT1, STAT3 et STAT5B (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Références associées : PMID:15184896 PMID:15627637
• La signalisation de l'IL-31 active également la voie MAPK (ERK1/2) par le recrutement de la protéine adaptatrice SHC1 (PubMed:15627637). Références associées : PMID:15627637
• Joue un rôle critique dans l'immunité cutanée, avec des implications dans les affections cutanées inflammatoires (PubMed:15184896). Références associées : PMID:15184896
• Améliore la survie des cellules progénitrices myéloïdes in vitro et induit l'expression de la résistine-like alpha (RETNLA) et de la protéine sérique amyloïde A dans les macrophages (Par similitude).
• La localisation subcellulaire est principalement sécrétée, cohérente avec sa fonction de cytokine.
• Détectée à faibles niveaux dans plusieurs tissus, notamment les testicules, la moelle osseuse, le muscle squelettique, le rein, le côlon, le thymus, l'intestin grêle et la trachée.
• Contient un peptide signal et est N-glycosylée ; la protéine mature prédite a un poids moléculaire d'environ 18,2 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 24-164 de l'IL-31 humaine, correspondant à la protéine sécrétée mature. Cette protéine recombinante a été utilisée comme immunogène, ce qui suggère que l'anticorps détecte la forme native traitée ; envisagez d'utiliser des conditions dénaturantes pour le Western blot pour assurer un dépliage complet, mais vérifiez les performances dans des conditions natives pour l'IF/ICC.
• Pour le Western blot, une protéine d'environ 18 kDa est attendue. Utilisez un gel SDS-PAGE à 12-15 % pour une résolution optimale des protéines de faible poids moléculaire et transférez sur une membrane PVDF ou de nitrocellulose avec une taille de pore de 0,2 µm.
• En immunofluorescence/immunocytochimie, puisque l'IL-31 est sécrétée, incluez un inhibiteur du transport des protéines (par exemple, la bréfeldine A) dans le milieu de culture avant la fixation pour piéger la protéine intracellulaire. Validez le motif de coloration avec des témoins positifs et négatifs appropriés.
• Pour l'ELISA, l'anticorps monoclonal peut être évalué comme réactif de capture ou de détection dans un format sandwich, associé à un autre clone ou à un anticorps polyclonal. Testez empiriquement les concentrations de revêtement et les conditions de tampon optimales.
• Bien que validé pour l'humain, la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été rapportée ; testez la réactivité dans votre système modèle si vous utilisez des échantillons non humains.

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