Anticorps polyclonal de lapin anti-IKKβ pour WB, ELISA - O14920

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'IKKβ

• IKKβ, également connu sous le nom d'IKK2 ou IKBKB, est une sérine/thréonine kinase et la sous-unité catalytique du complexe IκB kinase (IKK), essentielle pour la signalisation canonique NF-kappa-B. Références associées : PMID:9346484
• Il phosphoryle les inhibiteurs de NF-kappa-B (IκBs) sur des résidus de sérine critiques, déclenchant leur ubiquitination et leur dégradation protéasomique, libérant ainsi NF-kappa-B pour transloquer vers le noyau et activer la transcription de gènes immunitaires, prolifératifs et anti-apoptotiques. Références associées : PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416
• Au-delà des IκBs, IKKβ phosphoryle de multiples composants de signalisation, notamment NEMO, RELA, NFKB1, TBK1 et IKBKE, ainsi que des substrats tels que FOXO3, NAA10, NCOA3, BCL10, IRS1, RIPK1 et IRF5, affinant ainsi les réponses immunitaires et les voies de mort cellulaire. Références associées : PMID:11297557, PMID:14673179, PMID:20410276, PMID:15084260, PMID:17213322, PMID:19716809, PMID:25326418
• Suite à l'endocytose de TLR4 induite par le LPS, IKKβ phosphoryle STAT1 au résidu Thr-749, favorisant l'expression d'ARID5A et la stabilisation de l'IL-6, ainsi que la transcription d'IL-12B, reliant ainsi l'inflammation innée à l'immunité adaptative. Références associées : PMID:38621137, PMID:32209697
• IKKβ est localisé dans le cytoplasme, le noyau et les radeaux membranaires, ce qui est cohérent avec ses rôles dynamiques dans la transduction du signal.
• Il est fortement exprimé dans le cœur, le placenta, le muscle squelettique, le rein, le pancréas, la rate, le thymus, la prostate, les testicules et le sang périphérique, reflétant ses vastes fonctions régulatrices.
• Les mots-clés soulignent son implication dans la phosphorylation, l'acétylation, l'ubiquitination, les interactions hôte-virus et les variantes pathologiques, avec un poids moléculaire prédit d'environ 87 kDa (bien que la détection expérimentale varie entre 29 et 87 kDa en raison des isoformes/clivages).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, une bande correspondant à l'IKKβ pleine longueur est attendue aux environs de 87 kDa ; cependant, plusieurs bandes entre 29 et 87 kDa peuvent être observées en raison de l'épissage alternatif, de la dégradation ou de modifications post-traductionnelles. Validez à l'aide de témoins positifs (par exemple, cellules HeLa ou Jurkat stimulées au TNFα) pour confirmer la spécificité.
• Dans l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; envisagez de le coupler avec un anticorps monoclonal validé contre IKKβ pour le développement d'un ELISA sandwich. Des expériences de titration sont recommandées pour déterminer les concentrations de travail optimales.
• Comme l'immunogène couvre les acides aminés 400 à 669, l'anticorps cise la moitié C-terminale de la protéine et peut ne pas reconnaître les troncations N-terminales ou certains mutants associés à des maladies ; la réactivité croisée avec les membres de la famille proche (IKKα) doit être évaluée expérimentalement à l'aide de protéines recombinantes ou de lysats de knockout.

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