Anti-IKKβ pAb de lapin pour WB, IF/ICC, ELISA - O14920

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'Ikkβ

• Ikkβ est une sérine/thréonine-protéine kinase qui constitue la sous-unité catalytique essentielle du complexe IKK canonique, indispensable à l'activation de la signalisation NF-κB en aval des cytokines pro-inflammatoires, des récepteurs de reconnaissance de motifs moléculaires et du stress génotoxique. Références associées : PMID:9346484
• Il phosphoryle les protéines inhibitrices de κB (IκB) sur des résidus sérine conservés, ce qui déclenche leur polyubiquitination liée à K48 et leur dégradation par le protéasome. Ce processus libère les dimères de NF-κB (par exemple p65/p50) pour leur translocation nucléaire et la transcription des gènes immunitaires, de survie et inflammatoires. Références associées : PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416
• Au-delà des substrats IκB, IKKβ phosphoryle de multiples partenaires de signalisation — incluant NEMO/IKBKG, RELA et les kinases apparentées à IKK TBK1 et IKBKE — pour assurer à la fois une activation en avant et un rétrocontrôle négatif au sein du réseau NF-κB. Références associées : PMID:11297557, PMID:14673179, PMID:20410276
• La kinase cible également des substrats non canoniques comme FOXO3 (médiant l'inactivation induite par le TNF de ce facteur de transcription pro-apoptotique) et STAT1 (phosphorylé au niveau de Thr-749 pour favoriser la stabilisation d'ARID5A induite par IL-6 et l'activation d'IL-12B), intégrant ainsi NF-κB aux voies apoptotique et immunitaire innée. Références associées : PMID:15084260, PMID:32209697, PMID:38621137
• Des études de fractionnement subcellulaire et d'immunofluorescence localisent IKKβ majoritairement dans le cytoplasme, avec une translocation dépendante du signal vers le noyau et un recrutement vers les radeaux membranaires en réponse à certains stimuli.
• Le profilage de l'expression tissulaire révèle des niveaux élevés d'Ikkβ dans le cœur, le placenta, le muscle squelettique, le rein, le pancréas, la rate, le thymus, la prostate, les testicules et le sang périphérique, ce qui est cohérent avec son rôle dans le contrôle inflammatoire ubiquitaire.
• Les modifications post-traductionnelles — incluant l'acétylation, l'hydroxylation, la S-nitrosylation et la conjugaison isopeptidique (de type ubiquitine) — régulent finement la stabilité, l'activité d'Ikkβ et son interaction avec des partenaires régulateurs.
• D'un point de vue clinique, les mutations perte de fonction de IKBKB sont associées à l'immunodéficience combinée sévère (SCID) et à d'autres syndromes de dérégulation immunitaire, ce qui souligne son rôle non redondant dans l'homéostasie immunitaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les résidus 400 à 669 de la moitié C-terminale de l'Ikkβ humain. Cette région est distale du domaine kinase et peut détecter plusieurs variants d'épissage ou fragments protéolytiques, ce qui correspond à la gamme de 29 à 87 kDa observée en Western blot. Il est recommandé d'utiliser un cocktail d'inhibiteurs de protéases lors de la préparation des échantillons pour préserver les espèces de pleine longueur.
• Pour le Western blotting, validez la spécificité par extinction par siRNA ou knock-out CRISPR-Cas9 dans le système cellulaire concerné, et comparez avec le poids moléculaire prévu de la pleine longueur d'environ 87 kDa. Pour l'IF/ICC, attendez une coloration cytoplasmique et nucléaire inductible ; utilisez un co-marquage avec un marqueur nucléaire et vérifiez avec des contrôles négatifs appropriés.
• Pour les applications ELISA, utilisez la protéine recombinante IKKβ ou l'immunogène peptidique comme contrôle de capture positif, et titrez l'anticorps selon un protocole indirect standard pour optimiser le rapport signal sur bruit.

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