Anticorps polyclonal de lapin anti-IHH pour la WB et l'ELISA - Q14623

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IHH

• L'IHH (protéine Indian hedgehog) est un membre de la famille hedgehog, codée par le gène IHH. Le précurseur de pleine longueur subit un clivage autoprotéolytique et une modification par le cholestérol pour générer le morphogène N-produit actif.
N-produit de l'IHH active la voie de signalisation smoothened en se liant aux récepteurs patched (PTCH1/2), soulageant l'inhibition de SMO, ce qui est essentiel pour le développement osseux et cartilagineux.
• L'IHH régule positivement l'expression de PTHLH pour prévenir l'hypertrophie des chondrocytes lors de la formation osseuse endochondrale, et favorise indépendamment la prolifération des chondrocytes.
• L'IHH joue un rôle dans la signalisation paracrine hedgehog (PMID:24342078) et, lorsqu'elle est associée aux particules VLDL, agit comme un morphogène circulant pour maintenir l'intégrité des cellules endothéliales (PMID:20839884). Références connexes : PMID:24342078 PMID:20839884
• Au-delà du développement squelettique, l'IHH est impliquée dans le développement de l'épithélium pigmentaire rétinien, des photorécepteurs et des tissus périoculaires.
• Au niveau subcellulaire, la protéine réside dans les membranes du réticulum endoplasmique et de l'appareil de Golgi ; le N-produit sécrété peut s'associer à la membrane cellulaire.
• L'expression tissulaire est observée dans le poumon embryonnaire, ainsi que dans le rein et le foie adultes.
• Les principales modifications post-traductionnelles incluent le clivage autocatalytique, l'attachement du cholestérol et la palmitoylation ; la protéine est classée comme une glycoprotéine et une lipoprotéine.

Guidance expérimentale et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 202 à 411 de l'IHH humaine, couvrant une région distale par rapport au site de clivage autocatalytique. La protéine de pleine longueur a un poids moléculaire prédit de 45 kDa, mais il faut considérer que l'IHH endogène peut être traitée, entraînant des bandes supplémentaires en WB.
• Pour le Western blot, validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des témoins positifs appropriés (par exemple, des tissus ou des cellules connus pour exprimer l'IHH) et envisagez d'utiliser un témoin de chargement. Optimisez empiriquement les conditions de blocage et de détection.
• Cet anticorps polyclonal réagit avec l'IHH humaine, de souris et de rat, ce qui le rend adapté aux études interspécifiques. Cependant, confirmez la réactivité dans l'espèce cible si elle n'a pas été validée précédemment.
• Pour l'ELISA, le titrage de l'anticorps et les concentrations optimales de l'antigène de revêtement doivent être déterminés expérimentalement.
• Comme pour tout réactif polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre peut se produire ; envisagez de réserver un standard de calibration pour des résultats cohérents.

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