Anticorps polyclonal de lapin anti-IFNAR1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P17181

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IFNAR1

• L'IFNAR1 (Interferon alpha/beta receptor 1), également connu sous le nom de récepteur de cytokine de classe II membre 1 (CRF2-1), forme un récepteur hétérodimérique avec l'IFNAR2 pour les interférons de type I (IFN-α, IFN-β, IFN-ε, IFN-ω et IFN-κ). Références associées : PMID:10049744, PMID:14532120, PMID:15337770

• Lors de la liaison à l'interféron, la proximité de l'IFNAR1 et de l'IFNAR2 déclenche la phosphorylation croisée des Janus kinases associées (TYK2 sur l'IFNAR1, JAK1 sur l'IFNAR2), la phosphorylation des résidus tyrosine du récepteur, le recrutement et la phosphorylation des facteurs de transcription STAT, ainsi que leur translocation nucléaire pour réguler l'expression des gènes stimulés par l'interféron. Références associées : PMID:21854986, PMID:32972995, PMID:7665574, PMID:7526154, PMID:19561067

• L'IFNAR1 peut également agir indépendamment de l'IFNAR2 en tant que récepteur fonctionnel pour l'IFNB1, activant une voie de signalisation non-JAK-STAT.

• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire, les endosomes tardifs et les lysosomes, ce qui est cohérent avec l'internalisation et le trafic des récepteurs.

• Les récepteurs IFN sont exprimés de manière ubiquitaire. Il existe plusieurs isoformes : les isoformes 1, 2 et 3 sont détectées dans les cellules de myélome U266B1 sensibles à l'IFN, tandis que seules les isoformes 2 et 3 sont présentes dans les cellules U266R résistantes à l'IFN.

• L'IFNAR1 est un membre de la famille des récepteurs de cytokines de classe II, possédant des répétitions extracellulaires de fibronectine de type III et une hélice transmembranaire unique.

• Les principales modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la palmitoylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, ainsi que la formation de ponts disulfures et de liaisons isopeptidiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond au domaine intracellulaire C-terminal (aa 470–557), ce qui rend l'anticorps approprié pour des applications telles que le Western Blot (WB) et l'immunohistochimie (IHC) qui détectent l'IFNAR1 total, indépendamment du clivage du domaine extracellulaire ou de l'état de glycosylation.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), une perméabilisation est nécessaire pour permettre à l'anticorps d'accéder à l'épitope intracellulaire ; incluez des contrôles négatifs appropriés pour vérifier la spécificité.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut reconnaître plusieurs épitopes, ce qui améliore la sensibilité mais peut potentiellement augmenter le bruit de fond ; envisagez d'optimiser les conditions de blocage et de lavage.
• Réactivité croisée confirmée avec l'IFNAR1 de souris et de rat, mais l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène doit être vérifiée ; une validation dans le système modèle pertinent est recommandée.
• Pour les applications ELISA, assurez-vous que l'antigène de revêtement correspond à la région de l'immunogène ou à la protéine pleine longueur ; un format ELISA en sandwich peut améliorer le rapport signal sur bruit.
• Gardez les lysats cellulaires/tissulaires et les réactifs sur glace pendant la préparation pour minimiser la dégradation protéolytique de la cible d'environ 64 kDa.

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