Anticorps polyclonal de lapin anti-IFI16 - Q16666

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’IFI16

• L’IFI16 (protéine 16 inductible par l’interféron gamma, également connue sous les noms IFNGIP1 et PYHIN2) est un membre de la famille des protéines PYHIN, caractérisée par un domaine PYRIN en N-terminal et deux domaines HIN en C-terminal impliqués dans la liaison à l’ADN.
• Agit comme un capteur de l’ADN double brin, se liant préférentiellement aux structures d’ADN superenroulées et cruciformes, et joue un rôle dans la régulation transcriptionnelle, en agissant potentiellement comme un répresseur transcriptionnel.
• Est impliquée dans la régulation de la différenciation hématopoïétique et le contrôle de la prolifération cellulaire par la modulation de facteurs régulateurs du cycle cellulaire, notamment p53/TP53 et la protéine du rétinoblastome.
• Participe à l’activation transcriptionnelle médiée par TP53 en renforçant la liaison de TP53 à l’ADN de manière spécifique à la séquence ainsi que sa phosphorylation, et est impliquée dans l’activation dépendante du niveau énergétique de la voie ATM/AMPK/TP53, associée à la régulation de l’autophagie.
• Composant clé de la réponse immunitaire innée : reconnaît l’ADN viral double brin dans le cytosol et le noyau, recrute TMEM173/STING pour induire l’IFN-bêta et limite la réplication des herpèsvirus en inhibant l’expression des gènes viraux et en favorisant la formation d’hétérochromatine.
• Existe sous forme d’isoformes qui inhibent spécifiquement l’inflammasome AIM2 en se liant à l’ADN double brin cytoplasmique et en empêchant l’interaction AIM2-PYCARD, tout en induisant faiblement l’IFN-bêta via STING1 (PubMed:30104205). Références associées : PMID:30104205
• Se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, et est largement exprimée, avec des niveaux plus élevés dans les leucocytes du sang périphérique, les fibroblastes, les cellules lymphoïdes et des tissus tels que la prostate, les ovaires et le sein.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation, la phosphorylation et la formation de liaisons isopeptidiques, reflétant sa régulation dynamique dans l’apoptose, l’autophagie et les réponses inflammatoires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 500-785 et cible la région C-terminale de l’IFI16, qui comprend les domaines HIN. Cette région est essentielle à la liaison à l’ADN et peut être conservée entre les isoformes contenant ce segment, permettant potentiellement de détecter l’IFI16 pleine longueur ainsi que certaines isoformes.
• Pour le Western blot (WB), il est recommandé d’utiliser des lysats de cellules entières provenant de lignées cellulaires humaines connues pour exprimer l’IFI16 (p. ex. HeLa, THP-1). Les poids moléculaires prédits sont de 75 à 88 kDa ; des bandes supplémentaires peuvent correspondre à des isoformes ou à des formes modifiées post-traductionnellement.
• Pour la cytométrie en flux (FC), un marquage intracellulaire est recommandé en raison de la localisation nucléaire et cytoplasmique de l’IFI16. Validez l’anticorps dans le système d’échantillon approprié et incluez les contrôles adéquats.
• Les applications ELISA peuvent convenir à la détection de l’IFI16 dans des lysats cellulaires ou une protéine purifiée ; il est conseillé d’optimiser les conditions de revêtement et de détection.

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