Anticorps polyclonal de lapin anti-IDH3A pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50213

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’IDH3A

• IDH3A code la sous-unité alpha de l’isocitrate déshydrogénase mitochondriale dépendante du NAD, une enzyme clé du cycle de l’acide tricarboxylique (TCA).
• Elle catalyse la décarboxylation oxydative de l’isocitrate en alpha-cétoglutarate, en utilisant le NAD⁺ comme cofacteur et en nécessitant des ions métalliques divalents (Mg²⁺/Mn²⁺) pour son activité.
• L’enzyme fonctionne sous forme d’un hétérotétramère : deux sous-unités alpha s’associent à une sous-unité bêta (IDH3B) et à une sous-unité gamma (IDH3G) pour former le complexe pleinement actif ; les hétérodimères alpha/bêta et alpha/gamma présentent une activité basale.
• La protéine est localisée exclusivement dans la matrice mitochondriale, ce qui correspond à son rôle dans la respiration cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation et la phosphorylation, tandis que l’épissage alternatif génère plusieurs isoformes.
• Les mutations d’IDH3A sont associées à la rétinite pigmentaire, soulignant l’importance de l’intégrité du cycle de l’acide tricarboxylique pour la santé rétinienne.
• Les noms alternatifs comprennent sous-unité alpha de l’isocitrate déshydrogénase et sous-unité alpha de l’ICDH spécifique du NAD(+).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 28–366 de l’IDH3A humaine, englobant une partie importante de la protéine mature ; l’anticorps devrait détecter l’IDH3A endogène et recombinante.
• Pour le western blot (WB), une bande d’environ 40 kDa (poids moléculaire prédit de 39,6 kDa) devrait être observée ; inclure des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de tissus HeLa, HEK293, de souris ou de rat).
• En immunohistochimie (IHC‑P), optimiser les conditions de récupération antigénique (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) et valider la spécificité du signal à l’aide de peptides bloquants ou de tissus knock-out.
• Pour l’immunofluorescence (IF/ICC), confirmer le profil de marquage mitochondrial à l’aide d’une co-coloration avec un marqueur mitochondrial ; les conditions de perméabilisation peuvent nécessiter une optimisation.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet de réaliser des études translationnelles ; une validation indépendante dans le système d’échantillons concerné est recommandée.
• L’anticorps convient également aux applications ELISA ; son association avec d’autres anticorps anti-IDH3A peut permettre le développement d’un ELISA en sandwich.

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